檸檬酸（CA）含量測定?活性計算方法

檸檬酸（CA）含量測定活性計算：

（1） 按樣本蛋白濃度計算

單位的定義：每 mg 組織蛋白每分鐘生成 1 nmol 的 NADH 定義為一個酶活力單位。

α-KGDH活性（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109

]÷(V樣×Cpr) ÷T=1608×ΔA÷Cpr

（2） 按樣本鮮重計算：

單位的定義：每 g 組織每分鐘生成 1 nmol 的 NADH 定義為一個酶活力單位。

α-KGDH（nmol/min /g 鮮重）＝[ΔA×V 反總÷（ε×d）×109

]÷(W× V 樣÷V 樣總) ÷T=325×ΔA÷W

（3） 按細菌或細胞密度計算：

單位的定義：每 1 萬個細菌或細胞每分鐘生成 1 nmol 的 NADH 定義為一個酶活力單位。

α-KGDH 活性（nmol/min/104

 cell）＝[ΔA×V 反總÷（ε×d）×109

]÷(500×V 樣÷V 樣總)

÷T=0.65×ΔA

V 反總：反應體系總體積，2×10-4

 L；ε：NADH 摩爾消光系數，6.22×103

L / mol /cm；d：

比色皿光徑，1cm；V 樣：加入樣本體積，0.01 mL；V 樣總：加入提取液體積，0.202 mL；

T：反應時間，2min；Cpr：樣本蛋白質濃度，mg/mL；W：樣本質量，g；500：細菌或細

胞總數，500 萬。

b.用 96 孔板測定的計算公式如下

（1） 按樣本蛋白濃度計算：

單位的定義：每 mg 組織蛋白每分鐘生成 1 nmol 的 NADH 定義為一個酶活性單位。

α-KGDH 活性（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V 反總÷（ε×d）×109

]÷(V 樣×Cpr) ÷T=3216×ΔA÷Cpr

（2） 按樣本鮮重計算：

單位的定義：每 g 組織每分鐘生成 1 nmol 的 NADH 定義為一個酶活性單位。

α-KGDH 活性（nmol/min/g 鮮重）＝[ΔA×V 反總÷（ε×d）×109

]÷(W× V 樣÷V 樣總)

÷T=650×ΔA÷W

（3） 按細菌或細胞密度計算：

單位的定義：每 1 萬個細菌或細胞每分鐘生成 1 nmol 的 NADH 定義為一個酶活性單位。

α-KGDH 活性（nmol/min/104

 cell）＝[ΔA×V 反總÷（ε×d）×109

]÷(500×V 樣÷V 樣總) ÷T=1.3×ΔA

V 反總：反應體系總體積，2×10-4

 L；ε：NADH 摩爾消光系數，6.22×103

L / mol /cm；d：

96 孔板光徑，0.5cm；V 樣：加入樣本體積，0.01 mL；V 樣總：加入提取液體積，0.202 mL；

T：反應時間，2min；Cpr：樣本蛋白質濃度，mg/mL；W：樣本質量，g；500：細菌或細

胞總數，500 萬。