K599 電擊感受態細胞50ul*50包裝 返回列表頁

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產品名稱:K599 電擊感受態細胞50ul*50包裝
包裝：50ul*50
分類：表達感受態細胞
細胞培養的優點：
1.K599 電擊感受態細胞50ul*50包裝研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據要求可始終保持細胞活力，并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養一定代數后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。
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操作方法:
1. K599 電擊感受態細胞50ul*50包裝從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA (質粒或連接產物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入0.9 mL室溫S.O.C.或LB培養基(S.O.C.營養豐富，可提高轉化效率)。
4. 37℃，225 rpm復蘇60分鐘或30℃，225 rpm復蘇90分鐘。
(當質粒中含有不穩定片段時，30℃培養可降低錯誤重組的概率，若轉化control pUC19計算轉化效率，則需37℃，225 rpm復蘇60分鐘）
5. 5000rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的S.O.C. 或LB培養基上。
6. 將平板倒置放于37℃或30℃培養箱過夜培養。
*  兔胰島細胞5 x 10^5 cells/T25培養瓶

*  兔胰腺星狀細胞5 x 10^5 cells/T25培養瓶

*  兔造血干細胞5 x 10^5 cells/T25培養瓶

*  兔真皮毛細胞5 x 10^5 cells/T25培養瓶

*  兔脂肪微血管內皮細胞5 x 10^5 cells/T25培養瓶

*  兔支氣管平滑肌細胞5 x 10^5 cells/T25培養瓶

*  兔支氣管上皮細胞5 x 10^5 cells/T25培養瓶

小鼠腎集合管上皮細胞原代細胞　　

小鼠腎上腺皮質細胞原代細胞　*　

小鼠腎上腺髓質細胞原代細胞　原裝/進口　

小鼠腎系膜細胞原代細胞　　

小鼠腎小管上皮細胞原代細胞　*　

人腎上皮細胞微小RNA　  HREpiC miRNA　原裝/進口　

人腎系膜細胞微小RNA　  HRMC miRNA　　

人膀胱平滑肌細胞微小RNA　  HBdSMC miRNA　*　
K599 電擊感受態細胞50ul*50包裝酮脫氫酶酶檢測試劑盒　規格：　48T/96T

酮脫氫酶酶檢測試劑盒　規格：　48T/96T

酮羧化酶檢測試劑盒　規格：　48T/96T

酮羧化酶檢測試劑盒　規格：　48T/96T

酮激酶檢測試劑盒　規格：　48T/96T

酮激酶檢測試劑盒　規格：　48T/96T

酮激酶檢測試劑盒　規格：　48T/96T

酮激酶檢測試劑盒　規格：　48T/96T

糖異構酶1檢測試劑盒　規格：　48T/96T

糖異構酶1檢測試劑盒　規格：　48T/96T
技術傳授:
K599 電擊感受態細胞50ul*50包裝凍存培養基
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養基。凍存培養基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的*凍存培養基。
1）細胞凍存培養基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養基，其所含胎牛血清和牛血清比例經過優化，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。 
2）凍存培養基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養基，含10% DMSO，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養細胞凍存方案
以下實驗方案介紹了培養細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產品說明書。 
1.配制凍存培養基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養容器上脫離下來。用該細胞所需*培養基重新懸浮細胞。
3.采用血球計數器、細胞計數儀按照臺盼藍拒染法或者使用 Countess®自動細胞計數儀測定總細胞數和活細胞百分比。根據所需活細胞密度，計算凍存培養基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀。
注：離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養基重新懸浮細胞沉淀，將其調整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C。或者，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。