大鼠多酚氧化酶ELISA試劑盒使用說明書

大鼠多酚氧化酶ELISA試劑盒標(biāo)本要求
1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2．不能檢測(cè)含NaN3 的樣品，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

操作步驟
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
8.0 U/L 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

4.0 U/L 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 的5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

2.0 U/L 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 的4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

1.0 U/L 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 的3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

0.5 U/L 1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 的2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5 倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。
4. 配液：將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30 秒后棄去，如此重復(fù)5 次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15 分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 大鼠多酚氧化酶ELISA試劑盒測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD 值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
遺傳霉素 (G418) 干粉    100mg    非凍型組織 RNA 保存液    250mL
潮霉素 B 干粉    250mg    非凍型血液 RNA 保存液    10mL
甲酰胺，PCR 級(jí)    5mL    非凍型血液 RNA 保存液    100mL
嘌呤霉素干粉    25mg    冷凍型血液 RNA 保存液    100mL
β- 巰基乙醇，電泳級(jí)    1.5mL    非凍型細(xì)菌 RNA 保存液    100mL
   非凍型細(xì)菌 RNA 保存液    250mL
PCR 優(yōu)化試劑盒    1套    非凍型拭子病毒保存液    100mL
   病毒沉淀劑    100mL
    水樣病毒沉淀劑    10 次
電泳級(jí)丙烯酰胺溶液 ( 干粉型 )    200mL    動(dòng)物 RNAout(TRIzol)     100mL
   動(dòng)物 RNAout(TRIzol)     250mL
SDS-PAGE 濃縮膠配膠液    500mL    柱式動(dòng)物 RNAout    50 次
SDS-PAGE 分離膠配膠液    500mL    柱式動(dòng)物 RNAout    250 次
電泳級(jí)尿素    100g    大提柱式動(dòng)物 RNAout    5次
DNA 尿素 -PAGE 上樣液    1.5mL    柱式動(dòng)物 RNA-DNA 雙提試劑盒    50 次
DNA 尿素 -PAGE 上樣液    10mL    血液 RNAout     50 次
大鼠多酚氧化酶ELISA試劑盒