凍存細(xì)胞收集處理過程

        凍存細(xì)胞是通過冷凍保護(hù)機(jī)制將細(xì)胞放在低溫環(huán)境，減少細(xì)胞代謝，保持細(xì)胞活性，以便長期儲(chǔ)存的一種技術(shù)。細(xì)胞復(fù)蘇后，蛋白質(zhì)仍有活性，細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能仍完好。下面收到凍存細(xì)胞收集處理過程：

1、收到快遞后，若發(fā)現(xiàn)凍存管破損、箱內(nèi)已無干冰，請拍照后及時(shí)聯(lián)系供貨商。

2、收到細(xì)胞后請盡快復(fù)蘇，給凍存管（外觀×1張）拍照留存，隔天在倒置顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，給細(xì)胞（100倍×2張，200倍×2張）拍照，售后時(shí)需提供。

3、復(fù)蘇細(xì)胞時(shí)不可直接將凍存管丟進(jìn)水浴鍋，用鑷子夾住凍存管頂部，將凍存管下部浸入水中即可，由于水浴鍋處于實(shí)驗(yàn)室暴露、高溫、濕潤環(huán)境，極易滋生各種微生物，建議在水浴鍋中加入Deeming水浴鍋安全衛(wèi)士抑制各類微生物的滋生，大程度上防止水浴鍋中的微生物對凍存細(xì)胞造成的污染。

4、在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作，凍存管、試劑、耗材拿進(jìn)去之前一定要用75%酒精消毒，培養(yǎng)試劑盡量不要共用，若有共用試劑，建議配成完培后整體過濾除菌。

5、原代細(xì)胞傳代建議T25培養(yǎng)瓶1:2傳代 ，保種1支，另外1支傳代至T25新瓶，前面代次建議代代保種，以妨出現(xiàn)問題后無種可用，原代細(xì)胞需根據(jù)生長狀況判斷傳代比例。

6、第一次傳代時(shí)需要摸索消化時(shí)間，建議每隔30s就觀察一次，并記錄消化時(shí)間，細(xì)胞會(huì)隨著后期傳代次數(shù)的增多而延長消化時(shí)間。

7、由于細(xì)胞在運(yùn)輸過程中失去原有適宜的生長條件且長時(shí)間顛簸，收到細(xì)胞進(jìn)行復(fù)蘇后，前1-2代培養(yǎng)可適當(dāng)提高血清含量以促進(jìn)恢復(fù)細(xì)胞原有狀態(tài)并縮短到達(dá)對數(shù)期的時(shí)間。

8、原代細(xì)胞建議選用廠家供應(yīng)的專用培養(yǎng)基，否則可能會(huì)因?yàn)楦淖兣囵B(yǎng)條件，大大縮短細(xì)胞的培養(yǎng)代數(shù)，造成種子細(xì)胞的浪費(fèi)。

9、及時(shí)更換和補(bǔ)充培養(yǎng)箱水盤內(nèi)的水，建議加入Deeming細(xì)胞培養(yǎng)箱水盤安全衛(wèi)士進(jìn)行污染物的預(yù)防。

10、 購買的細(xì)胞只可用于科研，不得應(yīng)用于人體。