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當(dāng)前位置：上海撫生實業(yè)有限公司>>技術(shù)文章>>PCR反應(yīng)假陽性結(jié)果產(chǎn)生原因及解決方法
假陽性是指出現(xiàn)的 PCR 擴增條帶與目的靶序列條帶一致，有時其條帶更整齊，亮度更高。
產(chǎn)生的原因有：
①引物設(shè)計不合適：選擇的擴增序列與非目的擴增序列有同源性，因而在進(jìn)行 PCR 擴增時，擴增出的 PCR 產(chǎn)物為非目的序列；
②靶序列太短或引物太短；
③靶序列或擴增產(chǎn)物的交叉污染。
解決方法有：操作輕柔，防止靶序列吸入加樣槍內(nèi)或濺出離心管外造成污染；除酶及不能耐高溫的物質(zhì)外，所有試劑或器材高壓消毒；離心管及加樣槍頭等一次性使用。必要時，可在加標(biāo)本前，將反應(yīng)管和試劑用紫外光照射，以破壞存在的核酸。
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