配置常用細胞培養配套試劑詳述

幾種常用細胞培養配套試劑的配置(緩沖液、平衡鹽溶ye等)。

1、無鈣、鎂、離子溶液(1000ml)

氯化鈉(NaCl)8g磷酸二氫na、(NaH2PO4H20)0.05g、碳酸氫na(NaHCO3)1g、檸檬酸三鈉(Na3C6H5O7,H20)1g、葡萄糖1g、加去離子水或雙蒸水至1000mL

2、PBS(Phosphate-Buffered saline)磷酸鹽緩沖液

甲液:0.2mol/L磷酸氫二na溶液、磷酸氫二na(無水)28.4g、氯化鈉8.77g加去離子水或雙蒸水至1000mL

乙液:0.2mol/L磷酸二氫na溶液、磷酸二氫na(無水)2.4g、氯化鈉8.77g加去離子水或雙蒸水至1000mL

甲、乙液于4℃保存，使用時按表3-2所示比例，配制成所需pH濃度，高壓滅菌后室溫保存。

3、Hanks液(HBSSHank's Balanced salt solution)

 ⑴ 母液甲(20x)配法

①NaCl(A.R)160g、KCl(A.R)8g、MgSO4.7H2O(A.R)2g、MgCl.6H2O(A.R)2g依次溶于800mL雙蒸水中，前一物質溶后再加后一種。

②CaCl2(A.R)2.8g溶于100mL雙蒸水中，溶時不斷攪拌(此液應單配，單溶)。

待上述兩溶液中的"溶質"全溶后，將它們混合，再用雙蒸水補至1000mL，向其中加2mL作為防腐劑，置4℃保存。

 ⑵ 母液乙(20×)配法

①Na2HPO4.12H2O(A.R)3.04g、KH2PO4(A.R)1.20g、葡萄糖(A.R)20.0g溶于800ml雙蒸水中。

②0.4%酚紅液0.4g酚紅放在玻璃研缽后加0.01N、NaOH11.28mL，直到全部溶解，移入100mL容量瓶中，加水至100mL，過濾，pH為7.4，4℃保存。

待上述各"溶質"*溶解后，用雙蒸水補至1000mL,其中加2mL作防腐劑，置40℃保存。

（3) 使用液(1×)配法

取母液甲和母液乙各一份，加雙蒸水18份，分裝后，塞好瓶塞，掛上標志。以115℃高壓滅菌25分鐘(以免葡萄糖破壞)，置室溫后4℃保存，可使用幾個月。臨用前，用7.5%NaHCO3調至所需pH。

4、Eagle's液(EBSSEagle's Balanced salt solution)

是一種在二氧化碳(CO2)環境中短期維持細胞活性的平衡鹽溶ye，可用于細胞解離前的清洗、細胞或組織的運輸、細胞計數時稀釋、溶液的配置等。

5、HEPES液

生物緩沖液，化學性質穩定，在PH7.2~7.6范圍內，比NaHCO3緩沖液的緩沖能力更強。

6、NaHCO3緩沖液

常規緩沖體系的一部分，但是不穩定，易受空氣中CO2的含量而改變PH值，影響緩沖效果。