甘油三酯的提取

時(shí)間：2022/3/1閱讀：1450

甘油三酯，它是長(zhǎng)鏈脂肪酸和甘油形成的脂肪分子，也是人體內(nèi)含量最多的脂類(lèi)，大部分組織均可以利用甘油三酯分解產(chǎn)物供給能量，同時(shí)肝臟、脂肪等組織還可以進(jìn)行甘油三酯的合成，在脂肪組織中貯存。它不僅是細(xì)胞膜的主要成分，也是重要的呼吸底物和供能物質(zhì)，在脂肪酸運(yùn)輸過(guò)程中具有重要作用。血清中內(nèi)源性三酰甘油主要以VLDL的形式運(yùn)輸，外源性三酰甘油主要以CM的形式運(yùn)輸，甘油三酯含量的增高與動(dòng)脈粥樣硬化性心血管疾病密切相關(guān)。

　　甘油三酯經(jīng)KOH皂化水解生成甘油及脂肪酸，過(guò)碘酸氧化甘油生成甲醛，在銨離子存在下甲醛能夠與乙酰丙酮縮合生成黃色物質(zhì)，產(chǎn)物在420nm處具有特征吸收峰，通過(guò)吸光值的變化即可定量檢測(cè)甘油三酯的含量。

　　甘油三酯（TG）的提取（可根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果適當(dāng)調(diào)整樣本量及比例）

　　1、細(xì)菌或細(xì)胞：離心收集細(xì)菌或細(xì)胞至離心管內(nèi)，按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（10?個(gè)）：試劑一體積（mL）為（500-1000）：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL試劑一）處理樣品，冰浴超聲破碎（功率20%或200W，超聲2s，間隔1s，總時(shí)間1min），4℃8000g離心10min，取上清待測(cè)。

　　2、組織：按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積（mL）為1：（5-10）的比例（建議稱(chēng)取0.1g組織，加入1mL試劑一）處理樣品，冰浴勻漿，4℃8000g離心10min，取上清待測(cè)。

　　3、血清（漿）、培養(yǎng)液等液體樣本：直接測(cè)定或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定。

　　甘油三酯試劑盒先利用脂肪酶水解甘油三酯形成甘油和脂肪酸，然后利用雙酶聯(lián)反應(yīng)系統(tǒng)將釋放出來(lái)的甘油用比色法檢測(cè)。是基于比色法來(lái)檢測(cè)血清和血漿里面的甘油三酯的含量，檢測(cè)的吸光度值在540nm處檢測(cè)，儲(chǔ)存條件是-20度，穩(wěn)定期是6個(gè)月。

甘油三酯的提取

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