檢測elisa試劑盒實驗原理與步驟？

檢測elisa試劑盒試驗原理:

檢測elisa試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知ALT濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微

孔酶標(biāo)板內(nèi)進行檢測。先將ALT和生物素標(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)

過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的

深淺和樣品中ALT的濃度呈比例關(guān)系。

檢測elisa試劑盒操作注意事項：

試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。

實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。

不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。

使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。

底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。

加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。

按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。