檢測(cè)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)注意以下幾點(diǎn)

   檢測(cè)elisa試劑盒靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在臨床上得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大，如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。我將操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因總結(jié)于下，以期給同行帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

針對(duì)這種檢測(cè)elisa試劑盒“花板”現(xiàn)象我們通過多次實(shí)驗(yàn)的分析和判斷，總結(jié)了一些經(jīng)驗(yàn)，分析如下：

1、ELISA實(shí)驗(yàn)標(biāo)本、試劑、儀器

標(biāo)本 出入境人員的血液標(biāo)本。

試劑 HBsAg、HCV、HIV、梅毒試劑均為不同的ELISA試劑盒。

儀器 LD4-2型腦心機(jī)BID RAD1575型洗板機(jī)BID RAD550酶標(biāo)儀。

2、方法

所有被檢出入境人員的血液標(biāo)本，按照各個(gè)提供的ELISA試劑盒說明書進(jìn)行HBsAg-HCV-HIV梅毒等檢驗(yàn)項(xiàng)目操作。所有試劑均在有效期內(nèi)使用。

3 結(jié)果所使用不同公司的試劑有時(shí)會(huì)出現(xiàn)“花板”問題。

4、ELISA試劑盒分析

在所有標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)的過程中，所用的儀器及加樣過程都處于正常狀態(tài)的情況下，步驟均按照各種試劑說明書的要求去做，排除實(shí)驗(yàn)所用儀器和操作步驟對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響外，ELISA試劑盒內(nèi)的空白、陰性和陽(yáng)性對(duì)照以及室內(nèi)質(zhì)控值都很正常，只有檢測(cè)的血液標(biāo)本情況異常。根據(jù)國(guó)家和疾控中心報(bào)告陽(yáng)性率的比例不應(yīng)該是很高的情況下，HBsAg在用ELISA之前都經(jīng)過了快速金標(biāo)試劑的檢測(cè)，陽(yáng)性標(biāo)本得到了一定的控制。因此，原因可能是在標(biāo)本的處理，特別是放置時(shí)間、離心速度和離心時(shí)間方面的問題。所以，標(biāo)本的處理就成為實(shí)驗(yàn)結(jié)果的主要可疑因素。