elisa試劑盒提取土壤DNA的操作步驟

ＴＳＺelisa試劑盒土壤樣品含有大量的微生物，其中絕大部分的微生物都是無法直接培養進行繁殖和研究。從土壤樣品中提取DNA是研究土壤微生物zui為有效的方法。目前從土壤樣品中提取微生物DNA的方法主要有直接法和間接法。直接法是指把土壤樣品放在裂解液中，經過有效的破壁方法使微生物的DNA全部釋放到裂解液中，然后再進行分離提取。間接法是指將土壤放在一種的緩沖液中，把微生物從土壤中分離出來，然后再進行DNA的提取。間接法可大大降低土壤中腐殖酸，重金屬鹽對DNA提取帶來的影響，但是這種方法會丟失許多微生物，得到的DNA并非土壤樣品中的全基因組（宏基因組），目前已經很少研究者會采用這種方法。
從土壤樣品中直接提取DNA可zui大可能性地獲得全基因組，ＴＳＺelisa試劑盒土壤DNA提取操作方法：
1.取0.5g森林土壤/耕地土壤，或4g礦石區土壤和有機物污染土壤至15ml離心管中；
2.加入0.5g酸洗玻璃珠，或4g酸洗玻璃珠；
3.立即在渦旋儀上zui高速渦旋3分鐘。
4.加入100ul ，或800ul Buffer DS，渦旋15s混勻
5.轉移至預熱至70oC水浴鍋中，水浴10-15分鐘。
6.3000 x g離心3分鐘，轉移800ul，或7 ml 上清，并加入270ul Buffer SP2或2.3 ml Buffer SP2，渦旋混勻；
7.10,000 x g離心5分鐘，或5，000 x g離心10分鐘；
8.把上清液轉稱至新的2ml/15ml離心管中，加入0.7倍的異丙醇。（在處理礦石區樣品時和有機物污染的樣品中，還加入133ul糖原溶液），渦旋混勻；
9.10,000 x g離心5分鐘，或5，000 x g離心10分鐘沉淀收集DNA。
10.倒棄上清液，并反扣于吸水紙上5分鐘；
11.加入200 ul Elution Buffer，渦旋5秒。 65℃水浴20-60分鐘，讓DNA充分溶液。
12.加入50ul HTR,反應2min后，離心，取上清。
13.上清加入等體積（約200ul） XP2 Buffer，均勻后上柱。
14.加入300ul XP2 Buffer，洗滌一次。
15.加入700ul SPW Wash Buffer，洗滌兩次。
16.空甩后，加入適當量的Elution Buffer洗脫即可。
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