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    上海晶抗生物工程有限公司


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    公司動態(tài)

    ELISA試劑盒規(guī)范品試驗過程中怎么操控加樣和稀釋

    閱讀:160發(fā)布時間:2017-10-12

    1.ELISA試劑盒混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl別離加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中別離加規(guī)范品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl別離加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中別離加規(guī)范品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中別離取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔別離加規(guī)范品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。
    (稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度別離為30ng/L,20ng/L ,10ng/L,5ng/L, 2.5ng/L)。
    2. ELISA試劑盒加樣:別離設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其他各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,ELISA試劑盒然后再加待測樣品10μl(樣品終究稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,悄悄晃動混勻。
    3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
    4. 配液:將20倍濃縮洗刷液用蒸餾水20倍稀釋后備用。
    5. 洗刷:當心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗刷液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
    6. 加酶:每孔參加酶標試劑50μl,空白孔在外。
    7. 溫育:操作同3。
    8. 洗刷:操作同5。
    9. 顯色:每孔先參加顯色劑A50μl,再參加顯色劑B50μl,悄悄震動混勻,37℃避光顯色15分鐘.
    10.ELISA試劑盒停止:每孔加停止液50μl,停止反響(此刻藍色立轉黃色)。

     


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