ELISA試劑盒使用方法一
間接法
用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃過夜；
次日洗刷3次；
加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中參與暫時(shí)制造的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。
次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗刷緩沖液洗3次，每次3分鐘。（簡(jiǎn)稱洗刷，下同）。
間斷反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中參與2M硫酸0.05ml。
加一定稀釋的待檢樣品（不知道抗體）0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗刷；
（一同做空白、陰性及陽性孔對(duì)照）于反應(yīng)孔中，參與新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體（抗抗體）0.1ml；
37℃孵育35-60分鐘，洗刷；
畢竟一遍用DDW洗刷。
ELISA試劑盒使用方法二
雙抗體夾心法
包被：用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃ 過夜。
加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗刷。（一同做空白孔，陰性對(duì)照孔及陽性對(duì)照孔）。
加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，參與新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體（經(jīng)滴定后的稀釋度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小時(shí)，洗刷。
效果斷定：可于白色布景上，直接用肉眼查詢效果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無色或極淺，根據(jù)所呈顏色的深淺，以“+"、“-"號(hào)標(biāo)明。
ELISA試劑盒也可測(cè)OD值
在ELISA查看儀上，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值，若大于規(guī)矩的陰性對(duì)照OD值的2.1倍，即為陽性。
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