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    人*α1酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書

    閱讀:222發(fā)布時間:2017-10-25

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      上海晶抗生物工程有限公司

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    本試劑盒僅供研究使用。

    使用目的:
    本試劑盒用于測定人血清,血漿及相關(guān)液體樣本中*α1(Tα1)的含量。
    人*α1酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書實驗原理
    本試劑盒應用酶聯(lián)免疫競爭法測定標本中人*α1(Tα1)水平。用純化的人*α1(Tα1)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中加入*α1(Tα1),和HRP標記的*α1(Tα1)抗原,使它們競爭結(jié)合,,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。樣本顏色的深淺和樣品中的*α1(Tα1)的含量呈負相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人*α1(Tα1)的含量。  
    試劑盒組成 

    標本要求 
    1.標本處理:(1)水樣   采集后經(jīng) -20℃反復凍融三次,再經(jīng)玻璃纖維過濾后,備查
    (2)組織   樣品用丁醇:甲醇:水(5:25:70 V:V:V)抽提,或按相關(guān)文獻提取進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,備查
    2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
    人*α1酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書操作步驟

    1.加樣:分別設(shè)標準孔、空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上標準孔中加50微升,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
    2.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
    3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。   
    4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
    5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
    6.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
    7.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
    8.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。

    計算
      以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。 
    注意事項
    1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
    2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。
    3.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,*使用排槍加樣。
    4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
    5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
    6.底物請避光保存。
    7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
    8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
    9.本試劑不同批號組分不得混用。
    10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
    人*α1酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書檢測范圍:


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