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    上海晶抗生物工程有限公司


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    技術文章

    ELISA試驗的樣本預備

    閱讀:210發布時間:2017-5-2

                                                                                    

    ELISA試劑盒在搜集樣本前都有必要有一個完好的方案,有必要明白要檢查的成份是否足夠安穩。對搜集后當天就進行
    檢查的樣本,及時儲存在4℃備用。關于隔天再檢查的樣本,及時分裝后凍存在-20℃備用,有條件的,在-70℃凍存備用。標本應防止重復凍融。


    液體類標本:  包含血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
    1. 血清:
    室溫血液自然凝結10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。細心搜集上清。保留過程中如有沉積構成,應再次離心。
    2. 血漿:
    應根據標本的請求挑選EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。細心搜集上清。保留過程中如有沉積構成,應再次離心。
    3. 尿液:
    用無菌管搜集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。細心搜集上清。保留過程中如有沉積構成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實施。
    4. 細胞培養上清:
    檢查排泄性的成份時,用無菌管搜集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。細心搜集上清。
    5. 培養細胞
    檢查細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度到達100萬/ml左右。經過重復凍融或參加安排蛋白萃取試劑,以使細胞損壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。細心搜集上清。保留過程中如有沉積構成,應再次離心。
    6. 安排標本
    切割標本后,稱取分量。參加一定量的PBS,PH7.4。用液氮敏捷冷凍保留備用。標本融化后仍然堅持2-8℃的溫度。參加一定量的PBS(PH7.4),或安排蛋白萃取試劑, 用手藝或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。細心搜集上清。分裝后一份待檢查,其他冷凍備用。

     

    植物安排:首先要稱取樣本的鮮重,樣本分量不能低于50mg。

    1,勻漿液通常選擇PBS(PH=7.2-7.4)濃度為0.01mol/L。
    2,勻漿的份額為10%,即1g安排加9ml的勻漿液
    3,堅持樣本為鮮重。
    4,樣本分量不能低于50mg
    5,樣本溶解依照10%的份額,即1g安排加9ml的勻漿液進行溶解
    6,勻漿液選擇PBS


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