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    選用ELISA來定量測定結(jié)合的噬菌體

    時間:2017-11-10閱讀:185
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    洗刷緩沖液
    辣根過氧化物酶(HRP)連接的抗M13單克隆抗體(mAb)   
    HRP底物㈠OPD(鄰苯二胺,o-phe-nylenediamine)或ATBS  【2,2-連氮基-雙-(3-乙基苯并噻吡咯啉-6-磺 酸),2,2’-azinobis(3-ethylbenzothiazo-line-6-sulfonic acid)】
    預先預備的噬菌體包被的微孔板
    結(jié)合緩沖液
    [辦法]
    1,每塊板用洗刷緩沖液洗刷3次。
    2.用結(jié)合緩沖液將HRP聯(lián)結(jié)的抗M13單克隆抗體做1:5000稀釋,每孔參加100ul,室溫下孵育30分鐘。
    3.每塊板用洗刷緩沖液洗刷3次。
    4.每孔參加lOOglOPD顯色,不超越15分鐘后用50ul 2.5mol/L的HzS04停止反響。5.檢測每塊板在492nm處的吸光度。

     

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