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    ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)冷凍切片環(huán)節(jié)的注意事項(xiàng)

    時(shí)間:2018/2/26閱讀:269
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    ELISA試劑盒試驗(yàn)冷凍切片的染色
    切好的冷凍切片當(dāng)即投入丙酮中進(jìn)行固定,一般固定1~2 min即可進(jìn)行染色,用于免疫組化染色的冷凍切片應(yīng)在切片略干時(shí)馬上投入冷甲醇中固定10~15 rmin然后進(jìn)行相應(yīng)的組織化學(xué)染色程序。
    1.冷凍切片的HE染色程序。
    切片在丙酮中固定1~2 min。
    水洗5 s。
    在0.5%的鹽酸乙醇液中分化1~3 s。
    水洗5 s。
    甲苯I、二甲苯Ⅱ通明各5 s。
    運(yùn)用新鮮的Harris蘇木精染液染細(xì)胞核2min。
    水洗5 s。
    干組織周圍的二甲苯,在二甲苯?jīng)]有單調(diào)前滴加光學(xué)樹脂膠封片。
    在0.5%~1%的伊紅染液中染細(xì)胞質(zhì)20~30 s。
    水洗5 s。
    在95%乙醇I、95%乙醇Ⅱ、100%乙醇I、ELISA試劑盒100%乙醇Ⅱ、中逐級(jí)脫水各3~5 s。
    ELISA試劑盒試驗(yàn)冷凍切片的制造辦法
    運(yùn)用氯乙烷噴灑、二氧化碳噴射、半導(dǎo)體制冷的辦法均可制造一般的冷凍切片,用于術(shù)中的病理確診。恒冷箱冷凍切片機(jī)能夠制造適用于各種目地的冷凍切片,是現(xiàn)在zui為常用的志向冷凍切片制片辦法。
    標(biāo)本冷凍完成后將標(biāo)本托固定在切片機(jī)的機(jī)頭上,調(diào)整機(jī)頭方位使其剛好坐落切片刀的后方。
    將恒冷箱冷凍切片機(jī)的速凍頭和箱內(nèi)溫度調(diào)整到合適的切溫度,一般情況下為一18~一25℃。
    運(yùn)用粗切削辦法進(jìn)行標(biāo)本的粗切削至顯露標(biāo)本的zui大平面,ELISA試劑盒運(yùn)用自動(dòng)推進(jìn)辦法接連切削2~3刀后用毛筆鏟除機(jī)頭、標(biāo)本托及切片刀上的組織碎屑。
    以自動(dòng)推進(jìn)的辦法進(jìn)行切片,出色的切片將在防卷板的下方構(gòu)成一張無缺平整的薄片,如切片略有彎曲可用小毛筆悄然展平切片。
    在標(biāo)本冷凍托上涂布一層*一OCT,然后將選材后新鮮標(biāo)本安放在標(biāo)本冷凍托上并用OCT掩蓋標(biāo)本。
    翻開防卷板,用載玻片平穩(wěn)地輕壓切片使其平整地吸附到載玻片上。
    調(diào)整并供認(rèn)切片的厚度,一般為4~8 um,染脂肪和神經(jīng)組織應(yīng)控制在12~25 um。
    ELISA試劑盒試驗(yàn)放下防卷板使防卷板的方位剛好與切片刀的刀刃*平行并略突出于刀刃。

     

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