葉綠素儀可以即時測量植物的葉綠素相對含量或"綠色程度"，從而可以了解植物真實的硝基需求量并且?guī)椭私馔寥老趸娜狈Τ潭然蚴欠襁^多地施加了氮肥。您可以通過這種儀器來增加氮肥的利用率，并可保護環(huán)境(防止施加過多的氮肥而使環(huán)境特別是水源受到污染)。
工作流程
計算
二個LED光源發(fā)射二種光，一種是紅光(峰波長650nm)，一種是紅外線(940nm)，二種光穿透葉片，打到接收器上，光信號轉(zhuǎn)換成模擬信號，模擬信號被放大器放大，由模擬/數(shù)字轉(zhuǎn)換器轉(zhuǎn)換成數(shù)字信號，數(shù)字信號被微處理器利用，計算出SPAD值并顯示在顯示器上，也自動儲存到內(nèi)存中。
SPAD502葉綠素儀測量值的校準通過下面程序完成。
(1)在校準過程中，測量頭不夾樣品，二個LED次序發(fā)光，被接收的光轉(zhuǎn)換成電信號，光強度的比率被用來計算。
(2)在測量頭夾住樣品后，二個LED再次發(fā)光，通過葉片傳輸?shù)墓獯虻浇邮掌魃希晦D(zhuǎn)換成電信號，傳輸光的強度比率被計算。
(3)步驟1和2的值用于計算SPAD測量值，即表示夾住的樣品葉片當前葉綠素相對含量。
實驗結(jié)果計算:將測定得到的吸光值代入下面的式子:Ca=13.9665-6.88A649;Cb=24.96A649-7.32A665。據(jù)此即可得到葉綠素a和葉綠素b的濃度(Ca、Cb:mg/L)，二者之和為總?cè)~綠素的濃度。后根據(jù)下式可進一步求出植物組織中葉綠素的含量:
葉綠素的含量(mg/g)= [葉綠素的濃度×提取液體積×稀釋倍數(shù)]/樣品鮮重(或干重)。
測量前準備
1、電池安裝:擰開SPAD502下部的電池盒蓋，正極向里安裝2節(jié)AA電池;再擰上蓋。可以使用堿性電池和碳鋅電池，不能使用性質(zhì)不同或電量不同的電池。
2、使用讀數(shù)校驗卡
(1) 打開開關，同時按"1 DATA DELETE"鍵和"DATA RECALL"鍵，儀器進入檢查模式，屏幕立刻出現(xiàn)"CH"，然后轉(zhuǎn)到"CAL"狀態(tài)。
(2) 校準，直到出現(xiàn) 圖示，說明校準完成。
(3) 移動深度滑塊
(4) 插入讀數(shù)校驗卡，按下指壓臺，直到聽到一聲"嗶"聲，測量值顯示在屏幕上。
(5) 重復測量讀數(shù)校驗卡幾次。
(6) 按"AVERAGE"鍵，求測量的平均值，屏幕上顯示的平均值應在讀數(shù)校驗卡上的范圍之內(nèi)，如果不在范圍內(nèi)，請清潔發(fā)射窗和接收窗，從步驟1開始重復測量，如仍不在范圍內(nèi)，機器可能需要修理。
(7) 將電源關閉，然后重新開機，正常測量。
特別提示
l 讀數(shù)校驗卡只能在檢查模式下使用。
l 只有隨機的讀數(shù)校驗卡(與機器有機同序列號)能提供值。
l 讀數(shù)校驗卡不能在戶外使用，不能在陽光直射、高溫、高濕的環(huán)境中使用。
l 測量值與讀數(shù)校驗卡上的值不同時，不能通過輸入補償值修正。
l 不要碰讀數(shù)校驗卡的玻璃表面，如果臟了，可用濕的、軟布處理。
l 要將讀數(shù)校驗卡放在附件包里保護，并且不能放在高溫、高濕環(huán)境中
維護
(1) SPAD502是防水的，在下雨天可以照常使用，用后請用干軟布擦凈，但機器不能浸泡在水中或用水洗。
(2) 儀器不要劇烈振動。不要強壓顯示屏和測量頭
(3) 不要將儀器放在陽光下或熱源附近。
(4) 用后要關機。
(5) 儀器臟了，要盡量用干布擦凈，不能用酒精或化學藥品接觸儀器表面。
(6) 不要拆卸儀器。
(7) 保存溫度在-20~55℃，不要放在高溫高濕條件下，應與一些干燥劑放在一起。
(8) 如果保存期在二周以上，應將電池取出。
工作原理
測量值是通過對在二個不同波長區(qū)域，葉片傳輸光的數(shù)量進行計算，在這二個區(qū)域葉綠素對光吸收不相同的。這二個區(qū)域是紅光區(qū)(對光有較高的吸收且不受胡蘿卜素影響)和紅外線區(qū)(對光的吸收極低)。
Spad值是指葉綠素的相對含量，通過spad值可以了解植物硝基需求量，還可以推算出氮肥的含量。
因為spad值跟植物葉綠素含量是相關的，所以只要測量植物中葉綠素的含量，就能知道spad值，
葉綠素是吸收光線的主要物質(zhì)，不同波長的光線，葉片的吸收量不同，于是通過兩種波長范圍內(nèi)的透光系數(shù)來確定葉片當前葉綠素的相對數(shù)量。SPAD-502葉綠素儀就是通過測量葉子對兩個波長段里的吸收率，來評估當前葉子中的葉綠素的相對含量。
測量
SPAD502葉綠素儀的測量面積只有2mm*3mm(厚度不超過1.2mm)。中心線指示所測面積的中心。
1、校準。每次開機都需校準，請遵照以下程序進行
(1) 打開電源
(2) 不放樣品，按下探測頭，直到聽到"嗶"一聲，屏幕顯示N=0 ―――表明校準完成。
(3) 如果持續(xù)蜂鳴，出現(xiàn)圖示 ，表示校準未正確完成，按(2)重復進行校準。如果出現(xiàn)圖示 ，則發(fā)射窗或接收窗需要清潔，清潔后按(2)重新校準。
2、將葉片放入測量頭部
(1) 確定樣品*覆蓋接收窗。
(2) 不要測定過厚的樣品，例如葉脈，如果測定有較多葉脈的樣品，請多次測量并求平均值。
(3) 如果發(fā)射窗或接收窗臟了，測量不準確，要先清潔。
(4) 避免日光直射儀器，以免影響測量。
(5) 關閉測量頭，按指壓臺直到聽到一"嗶"聲，測量結(jié)果會顯示在屏幕上，并自動儲存。
(6) 如果聽到連續(xù)的蜂鳴，說明測量頭閉合不嚴，或者樣品太厚或太薄，重復2、3步測量，直到測定結(jié)束。
(7) 如果顯示的結(jié)果小數(shù)點閃爍(或者沒有小數(shù)點)，說明測量結(jié)果大于50(100)，結(jié)果的性不能保證。
3、數(shù)據(jù)儲存
(1) SPAD502在測定完后自動儲存，存儲空間為30個數(shù)據(jù)，當存儲滿了后，*個數(shù)據(jù)將被刪除，新的數(shù)據(jù)存儲在第30位置，即刪除了第1個，那么原來的2~30變?yōu)?~29。當機器關閉后，所有的數(shù)據(jù)都被刪除。
(2) 平均:所有存儲的數(shù)據(jù)進行平均計算。
(3) 清空:所有的數(shù)據(jù)被刪除。
(4) 刪除當前數(shù)據(jù):刪除當前顯示的數(shù)據(jù)
(5) 瀏覽數(shù)據(jù):顯示以前數(shù)據(jù)。
4、輸入補償值
補償值是用戶根據(jù)自己的需要輸入，進行數(shù)據(jù)修訂的，這種修訂是以幾臺儀器的標準化為依據(jù)的。補償值可以設-9.9~9.9。補償值輸入后，數(shù)據(jù)按照如下公式計算:顯示值=測量值+補償值
(1) 進入補償值模式:打開電源 同時按"AVERAGE"和"DATA RECALL"，LCD顯示以前輸入的補償值。
(2) 設置補償值:通過按"ALL DATA CLEAR"鍵和"1 DATA DELETE"鍵設置補償值，每按"ALL DATA CLEAR"鍵一次，補償值增加0.1，每按"1 DATA DELETE"鍵一次，補償值減少0.1。補償值范圍可設在-9.9~9.9。讀數(shù)校驗卡不能用來確定補償值。
(3) 補償值保存:按"AVERAGE"鍵，顯示的補償值將被保存，完成輸入。關機，然后再開機，補償值被起用，可以開始測量。
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