ELISA四種檢測法優(yōu)缺點比較

ELISA是一種廣泛應用在測定液體樣本中的蛋白、抗體、或激素的免疫剖析技術。酶聯(lián)免疫吸附實驗的規(guī)范程序，通常是把蛋白、抗體、或激素等（即抗原）直接或是以捕捉抗體（capture Ab）固定在固相載體上，再參加一級檢測抗體（primarydetection Ab），構成一個抗原抗體的復合物。ELISA四種檢測法優(yōu)缺點比較如下：

1.直接法（direct ELISA） 

將抗原直接固定在固相載體上，參加酶符號的一級抗體，即可測定抗原總量，此一級抗體的特異性非常重要。

優(yōu)勢：操作手續(xù)簡略，因無須運用二抗可防止交互反響。

缺陷：實驗中的一抗都得用酶符號，但不是每種抗體都適合做符號，費用相對進步。

2.間接法（indirect ELISA） 

此測定辦法與直接法相似，不一樣在于一級抗體沒有酶符號，改用酶符號的二級抗體去辨識一級抗體來測定抗原量。

優(yōu)勢：二抗能夠加強信號，并且有多種挑選能做不一樣的測定剖析。不加酶符號的一級抗體則能保存它zui多的免疫反響性。

缺陷：交互反響發(fā)作的機率較高。

3.雙抗體夾心法（sandwich ELISA） 

被檢測的抗原包被在兩個抗體之間，其間一個抗體將抗原固定于固相載體上，即捕捉抗體。另一個則是檢測抗體，此抗體可用酶符號后直接測定抗原的量；或不符號，再透過酶符號的二級抗體來測定抗原的量。這兩種抗體有必要當心選擇，才可防止交互反響或競爭一樣的抗原部位。

優(yōu)勢：高活絡、高專一性，抗原無須事前純化。

缺陷：抗原必定得具有兩個以上的抗體部位。

4.競爭法（competitive ELISA） 

樣本里的抗原（自在抗原）和純化并固定在固相載體上的抗原（固定抗原）一同競爭一樣的抗體，當樣品里的自在抗原越多，就能夠越多的抗體，而固定抗原就只能到較少的抗體，反之亦然。經清潔過程，洗去自在抗原和抗體的復合物，只留下固定抗原和抗體的復合物，拿來與只要固定抗原的對照組成果相比擬，依據呈色區(qū)別就可計算出樣品里的抗原含量。

優(yōu)勢：可適用比擬不純的樣本，并且數(shù)據再現(xiàn)性很高。

缺陷：全體的敏感性和專一性都較差。