人剛地弓形蟲elisa試劑盒 返回列表頁

人剛地弓形蟲elisa試劑盒實驗原理：

用純化的MT抗體包被微孔板，制成固相載體，往微孔中依次加入標本或標準品、*化的MT抗體、HRP標記的親和素，經過*洗滌后用底物（TMB）顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的MT呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計算樣品濃度。

產品規格：96T

產品英文： Human Toxoplasma Gondii,T.gondii elisa Kit

產品用途：僅供科研使用

檢測范圍：15.6 pg/ml - 1,000 pg/ml

特 異 性：本試劑盒可同時檢測重組或天然的，且與其它相關蛋白無交叉反應

人剛地弓形蟲elisa試劑盒顯色的重要性

顯色是ELISA中的zui后一步溫育反應，此時酶催化無色的底物生成有色的產物。反應的溫度和時間仍是影響顯色的因素。在一定時間內，陰性孔可保持無色，而陽性孔則隨時間的延長而呈色加強。適當提高溫度有助于加速顯色進行。在定量測定中，加入底物后的反應溫度和時間應按規定力求準確。定性測定的顯色可在室溫進行，時間一般不需要嚴格控制，有時可根據陽性對照孔和陰性對照孔的顯色情況適當縮短或延長反應時間，及時判斷。

OPD底物顯色一般在室外溫或37℃反應20-30分鐘后即不再加深，再延長反應時間，可使本底值增高。OPD底物液受光照會自行變色，顯色反應應避光進行，顯色反應結束時加入終止液終止反應。OPD產物用酸終止后，顯色由橙黃色轉向棕黃色。

TMB受光照的影響不大，可在室溫中置于操作臺上，邊反應觀察結果。但為保證實驗結果的穩定性，宜在規定的適當時間閱讀結果。TMB經HRP作用后，約40分鐘顯色達，隨即逐漸減弱，至2小時后即可*消退至無色。TMB的終止液有多種，疊氮鈉和SDS等酶抑制劑均可使反應終止。這類終止劑尚能使藍色維持較長時間(12-24小時)不褪，是目視判斷的良好終止劑。此外，各類酸性終止液則會使藍色轉變成黃色，此時可用特定的波長(450nm)測讀吸光值。

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