染色體結(jié)構(gòu)顯示與檢測

1）染色體顯帶 
顯Q帶法 
1. 漂洗：取經(jīng)過干熱預(yù)處理或已老化的染色體標(biāo)本，置于pH6.0緩沖液中浸5~10分鐘。 
2. 染色：浸入pH6.0的GM或QD染液中5~10分鐘。 
3. 漂洗：浸入新鮮pH6.0緩沖液中漂洗兩次，每次5分鐘。 
4. 觀察：向標(biāo)本染色體面滴1~2滴新鮮緩沖液，覆以蓋片（避免出氣泡），置熒光顯微鏡下觀察。 

顯G帶法 
*-Giemsa混合顯帶法 
1．預(yù)處理：取中期染色體標(biāo)本，置60℃～60℃溫箱中20～30分鐘，或在37℃溫箱隔夜，然后浸入0.025M磷酸緩沖液中，pH6.8，56℃溫浴10分鐘。 
2．消化和染色：用現(xiàn)配制的*-Giemsa混合液消化和染色10～30分鐘，混合液按如下比例配制： 
0.025 M 磷酸緩沖液pH6.8 73.0 ml 
甲醇 27.0 ml 
Giemsa干粉 50.0 mg 
0.25%* 0.3～0.4 ml 
3．封片：染色后用自來水沖洗，入蒸餾水漂洗數(shù)次、晾干、二甲苯透明2~3分鐘，封入中性樹脂中。 

Giemsa顯帶法 
1．預(yù)處理：將標(biāo)本置入60~80℃溫箱或烤箱中20~30分鐘，亦可在37℃溫箱過夜。 
2．*消化：用0.85%的NaCl配制0.25%*溶液消化3~5分鐘。 
3．染色：取出標(biāo)本片，先直立于吸水紙上除去多余*液后，隨即置入Giemsa染液中，染10分鐘。 
4．封片：自來水洗，蒸餾水漂洗，晾干，二甲苯透明2~3分鐘，封入中性樹膠中。 

2）姐妹染色單體分化染色 
BUdR摻入和制片程序 
1．BUdR培養(yǎng)液制備：先制備好含BUdR的培養(yǎng)液（zui終濃度為3~10微克/毫升）。 
2．BUdR摻入：如用傳代細(xì)胞，在末次傳代后，改換用含BUdR的培養(yǎng)液培養(yǎng)。如為人末梢血細(xì)胞，一開始就用含BUdR培養(yǎng)液培養(yǎng)（培養(yǎng)瓶放在特制黑色木盒、黑布中或黑紙包裹）37℃溫箱內(nèi)培養(yǎng)。 
3．中止摻入與制片：待細(xì)胞經(jīng)歷兩個細(xì)胞周期（人周圍血細(xì)胞培養(yǎng)48或72小時）