培養基的配制與滅菌技術

    培養基是將微生物生長繁殖所需要的各種營養物質，用人工的方法配制而成的用于培養微生物的營養基質。培養基種類很多，不同的微生物所需培養基不同。就培養基中營養物質的來源可分為天然培養基、合成培養基和半合成培養基。按培養基特殊用途可分加富培養基，選擇培養基、鑒別培養基。按培養基制成后的物理狀態可分為固體培養基，液體培養基和半固體培養基。固體培養基是在液體培養基中加入1.5 %-2.0 %瓊脂作凝固劑; 半固體培養基則加入0.5 %-0.8 %的瓊脂。

    一般培養基除含有大量水分外, 還含有碳素、氮素、無機鹽類和維生素等。此外, 由于徽生物生長繁殖必須在zui適的酸堿度范圍內, 才能表現出zui大的生命活力, 因此應根據不同種類的徽生物. 將培養基調節到一定的pH值范圍。
　　培養基配制后還必須進行滅菌, 滅菌是指殺死或消滅所有微生物, 包括營養體、孢子和芽孢。滅菌的方法很多，可分為物理方法與化學方法兩大類。物理方法包括濕熱滅菌、干熱滅菌、紫外線滅菌、過濾除菌等; 化學方法主要是利用化學藥品對接種室空間、用具和其它物體表面進行滅菌與消毒。消毒一般是指消滅有害微生物的營養體和病原菌。

(一) 培養基的配制方法

l. 按照配方的組分及用量先分別稱量并配成液體；
2. 根據要求調到一定的酸堿度(pH值)；
3. 若要制成固體則加入2%瓊脂并加熱融化；
4. 根據需要的數量分裝入試管或三角瓶中, 加上棉塞或蓋上紗布；

5. 包扎好滅菌后備用。

(二) 培養基及常用器皿的滅菌
　　培養微生物常用的玻璃器具主要有試管、三角瓶、培養皿、吸管等, 在使用前必須*行滅菌, 使容器中不含任何雜菌；培養微生物用的營養基質(培養基), 在接入純種前也必須先行滅菌, 使培養基呈無菌狀態。培養基可分裝入器皿中一起滅菌, 也可在單獨滅菌后以無菌操作分裝入無菌的器皿中。

注：1. 棉塞制作與器皿包扎。

    2. 培養基與器皿的高壓蒸汽滅菌。

    3. 玻璃器皿的干熱滅菌。