一,基本原理
利用紫外－可見吸收光譜來進行定量分析由來已久，可追溯到古代，公元60年古希臘已經知道利用五味子浸液來估計醋中鐵的含量，這一古老的方法由于zui初是運用人眼來進行檢測，所以又稱比色法。到了16、17世紀，相關分析理論開始蓬勃發展，1852年，比爾（Beer）參考了布給爾（Bouguer）1729年和朗伯（Lambert）在1760年所發表的文章，提出了分光光度的基本定律，即液層厚度相等時，顏色的強度與呈色溶液的濃度成比例，從而奠定了分光光度法的理論基礎，這就是的朗伯－比爾定律。
1．紫外－可見吸收光譜的形成
吸光光度法也稱做分光光度法，但是分光光度法的概念有些含糊，分光光度是指儀器的功能，即儀器進行分光并用光度法測定，這類儀器包括了分光光度計與原子吸收光譜儀（AAS）。吸光光度法的本質是光的吸收，因此稱吸光光度法比較合理，當然，稱分子吸光光度法是zui確切的。
紫外－可見吸收光譜是物質中分子吸收200-800nm光譜區內的光而產生的。這種分子吸收光譜產生于價電子和分子軌道上的電子在電子能級躍遷（原子或分子中的電子，總是處在某一種運動狀態之中。每一種狀態都具有一定的能量，屬于一定的能級。這些電子由于各種原因（如受光、熱、電的激發）而從一個能級轉到另一個能級，稱為躍遷。）當這些電子吸收了外來輻射的能量就從一個能量較低的能級躍遷到一個能量較高的能級。因此，每一躍遷都對應著吸收一定的能量輻射。具有不同分子結構的各種物質，有對電磁輻射顯示選擇吸收的特性。吸光光度法就是基于這種物質對電磁輻射的選擇性吸收的特性而建立起來的，它屬于分子吸收光譜。躍遷所吸收的能量符合波爾條件：
