ELISA試劑盒樣本的處理方案,不要錯(cuò)過哦！

ELISA 檢測的目的是為實(shí)驗(yàn)提供準(zhǔn)確可靠的定量分析實(shí)驗(yàn)依據(jù)。為了保證實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠性，在實(shí)驗(yàn)過程中必須堅(jiān)持全面質(zhì)量控制和全過程質(zhì)量控制。在收集標(biāo)本前都必須有一個(gè)完整的計(jì)劃。ELISA樣本的處理是elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)關(guān)鍵的步驟！
標(biāo)本類型：

ELISA 常見的標(biāo)本一般包括：
◆ 液體類標(biāo)本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
◆ 培養(yǎng)細(xì)胞
◆ 組織標(biāo)本
這些標(biāo)本收集的時(shí)間、方法和保存都有一定的要求。

標(biāo)本的保存：

一般說來，在5天內(nèi)測定的標(biāo)本可放置于 4℃，超過一周測定的需低溫凍存。
對收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測的標(biāo)本，儲(chǔ)存在 4℃?zhèn)溆茫缬刑厥庠蛐枰芷谑占瘶?biāo)本，將標(biāo)本及時(shí)分裝后放在 -20℃或 -70℃條件下保存。避免反復(fù)凍融。 
標(biāo)本2-8℃ 可保存48小時(shí)，-20℃可保存1個(gè)月，-70℃可保存6個(gè)月。
部分標(biāo)本也可加入適當(dāng)防腐劑，激素類標(biāo)本需添加抑肽酶。

樣本的處理：

◆ 血清： 
室溫血液自然凝固 10-20 分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。收集上清。如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
◆ 血漿： 
應(yīng)根據(jù)試劑盒的要求選擇 EDTA 、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，加入10 ％（v/v）抗凝劑（0.1M 檸檬酸鈉或1% heparin 或 2.0%EDTA.Na2）混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
◆ 尿液、胸腹水、腦脊液： 
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
◆ 細(xì)胞培養(yǎng)上清： 
檢測分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml 左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。 
◆ 細(xì)胞： 
檢測細(xì)胞的成份時(shí)，對于貼壁細(xì)胞，去除培養(yǎng)液，用PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。加入適量裂解液。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細(xì)胞充分接觸。
通常裂解液接觸細(xì)10秒后，細(xì)胞就會(huì)被裂解。
對于懸浮細(xì)胞，離心收集細(xì)胞，用PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍.加入適量裂解液, 用槍吹打把細(xì)胞吹散。用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。
如果細(xì)胞量較多，必需分裝然后再裂解。充分裂解后，10000-14000g離心3-5分鐘，取上清，即可進(jìn)行后續(xù)操作。
◆ 組織標(biāo)本： 
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的 PBS 或組織蛋白萃取試劑，緩沖液中可加入蛋白酶抑制劑。用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清置于 -20度或 -70度保存，如有必要，可以將樣品濃縮干燥。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。