ELISA技術(shù)和WESTERN的不同是什么?

    酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)
    酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（又稱酵素免疫分析法，Enzyme-linked immunoassay，簡稱ELISA）利用抗原抗體之間專一性鍵結(jié)之特性，對(duì)檢體進(jìn)行檢測；由于結(jié)合于固體承載物(一般為塑膠孔盤)上之抗原或抗體仍可具有免疫活性，因此設(shè)計(jì)其鍵結(jié)機(jī)制后，配合酵素呈色反應(yīng)，即可顯示特定抗原或抗體是否存在，并可利用呈色之深淺進(jìn)行定量分析。根據(jù)待測樣品與鍵結(jié)機(jī)制的不同，ELISA可設(shè)計(jì)出各種不同類型的檢測方式，主要以三明治法（sandwich）、間接法（indirect）、以及競爭法（Competitive）三種為主。

    Western blot
    是分子生物學(xué)、生物化學(xué)和免疫遺傳學(xué)中常用的一種實(shí)驗(yàn)方法，也是HIV檢測的方法之一。

    利用特定抗體能夠?qū)Ｒ唤Y(jié)合其抗原蛋白質(zhì)的原理來對(duì)樣品進(jìn)行著色，通過分析著色的位置和著色深度獲得特定蛋白質(zhì)在所分析的細(xì)胞或組織中的表達(dá)情況的信息，來分析檢測特定蛋白質(zhì)的生物學(xué)檢測技術(shù)。

    一般認(rèn)為是美國斯坦福大學(xué)的喬治·斯塔克（George Stark）。在尼爾·伯奈特（Neal Burnette）于1981年所著的《分析生物化學(xué)》（Analytical Biochemistry）中被稱為Western Blot。

    Western Blot與Southern或Northern雜交方法類似，但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳，被檢測物是蛋白質(zhì)，“探針”是抗體，“顯色”用標(biāo)記的二抗。經(jīng)過PAGE分離的蛋白質(zhì)樣品，轉(zhuǎn)移到固相載體（例如硝酸纖維素薄膜）上，固相載體以非共價(jià)鍵形式吸附蛋白質(zhì)，且能保持電泳分離的多肽類型及其生物學(xué)活性不變。以固相載體上的蛋白質(zhì)或多肽作為抗原，與對(duì)應(yīng)的抗體起免疫反應(yīng)，再與酶或同位素標(biāo)記的第二抗體起反應(yīng)，經(jīng)過底物顯色或放射自顯影以檢測電泳分離的特異性目的基因表達(dá)的蛋白成分。該技術(shù)也廣泛應(yīng)用于檢測蛋白水平的表達(dá)。