滬鼎教你如何避免ELISA實驗中“花板”出現

Elisa試驗是一種敏感性高，特異性強，重復性好的實驗診斷方法，ELISA試劑盒實驗中有很多因素影響著實驗結果，導致出現“花板"問題。為了避免“花板"問題的出現，降低檢測的假陽性率，獲得更理想的實驗結果，首先我們在選擇ELISA試劑時，應選擇靈敏度高、特異性好、穩定性好、批間差小、價格操作方便、省時的試劑。并在檢驗的過程中應采取下列措施:

(1)檢測之前，加大離心轉速，盡量延長時間，使血細胞和纖維蛋白充分沉淀，讓血細胞與血清*分離。

(2)抽取樣本時應抽出足夠檢驗量的血液標本，選擇無添加劑的真空試管，ELISA試劑盒便于離心，得到足夠的血清。

(3)血液標本應置于室溫下1～2h，使血液凝固收縮，然后離心檢測或讓血液過夜后再檢測。這樣才能使得血液充分收縮，讓標本中的非特異性物質所致的假陽性率降至zui低。

(4)加樣時不能加入紅細胞或纖維蛋白，要按照操作說明書去做，否則會影響實驗結果。

(5)封板溫育時，各孔一定要封嚴，防止陽性標本的液體蒸發，產生周邊現象從而導致“花板"的出現。

(6)手工洗板時應注意液體被濺出或孔與孔之間的液體溢出，連成整體液面后產生“花板"。

(7)洗液的溫度也會影響洗板的干凈程度，尤其是冬天溫度過低時容易出現“花板"問題。

(8)用洗板機洗板時應防止針口有纖維蛋白或異物，這些異物在洗板的過程中易產生拖帶現象而導致“花板"的出現。

因此，ELISA試劑盒出現“花板"原因可能是在標本的處理，特別是放置時間、離心速度和離心時間及溫度方面的問題。所以，標本的處理就成為實驗結果的主要可疑因素。

上海滬鼎公司主要代理產品：

   試劑盒：ELISA試劑盒、檢測試劑盒、免疫組化試劑盒、放免試劑盒、分子生物學試劑盒、金標檢測試劑盒、Omega試劑盒、細胞凋亡試劑盒、生化試劑盒。
   各種動物血清：內皮細胞血清、HyClone、GIBCO胎牛血清。
   抗體：進口原裝抗體、進口分裝抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、單標抗體、雙標抗體、多標抗體、一抗、二抗；免疫組化抗體、免疫熒光抗體、流式細胞抗體、免疫細胞化學抗體。
   細胞：*細胞、腫瘤細胞、正常細胞、腫瘤耐藥細胞
   生化試劑：*生化試劑、進口分裝生化試劑。