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    小鼠白介素6酶聯(lián)免疫分析

    時間:2014/12/16閱讀:1083
    分享:

    小鼠白介素6(IL-6)酶聯(lián)免疫分析

     

    檢測范圍:                                                          

    0-8 ng/L

    使用目的:

    本試劑盒用于測定小鼠血清、血漿及相關液體樣本中白介素6(IL-6)含量

    實驗原理

    本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠白介素6(IL-6)水平。用純化的小鼠白介素6(IL-6)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入白介素6(IL-6)再與HRP標記的白介素6(IL-6)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMBHRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白介素6(IL-6)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中小鼠白介素6(IL-6)濃度。

    試劑盒組成

    1

    30倍濃縮洗滌液

    20ml×1

    7

    終止液

    6ml×1

    2

    酶標試劑

    6ml×1

    8

    標準品(16ng/L

    0.5ml×1

    3

    酶標包被板

    12孔×8

    9

    標準品稀釋液

    1.5ml×1

    4

    樣品稀釋液

    6ml×1

    10

    說明書

    1

    5

    顯色劑A

    6ml×1

    11

    封板膜

    2 

    6

    顯色劑B

    6ml×1/

    12

    密封袋

    1

    標本要求

    1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20保存,但應避免反復凍融

    2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

    操作步驟

    1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

    8 ng/L

    5號標準品

    150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液

    4 ng/L

    4號標準品

    150μl5號標準品加入150μl標準品稀釋液

    2 ng/L

    3號標準品

    150μl4號標準品加入150μl標準品稀釋液

    1 ng/L

    2號標準品

    150μl3號標準品加入150μl標準品稀釋液

    0.5 ng/L

    1號標準品

    150μl2號標準品加入150μl標準品稀釋液

    加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl

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