小鼠ELISA試劑盒揭示小鼠氣道反應性的檢測

    小鼠ELISA試劑盒揭示小鼠氣道反應性的檢測，目前國內在對支氣管哮喘 ( 簡稱哮喘) 小鼠的評價上多數僅僅立足于氣道炎性指標 ,在氣道反應性的檢測方面近幾年才起步 ,而且是用有創的方法。我所從國外引進了動物*檢測的* 。*后再測定動物氣道阻力的有創法是評價動物氣道反應性的經典方法 。 *法則不需*等繁瑣的步驟 ,在動物處于自然狀態下就可以直接測定其氣道反應性 ,而且每次可以同時檢測多只小鼠 ,具有較大的*性 ,但能否取代有創法尚需更多的數據 。 因此 ,我們有必要探討其與有創法的相關性 ,判定其是否能夠有效檢測動物的氣道反應性 ,以期建立哮喘小鼠氣道反應性的*檢測方法 。
    儀器小鼠**和有創*，實驗動物SP F 級 BALB/ c 雌鼠 ,5～6 周齡 ,體質量 18～20 g 。
    哮喘模型的建立方法
    實驗第 0 天 、 第 7 天和第 14 天行腹腔注射致敏 :模型組每次給予 20μ g OV A + 150μ l Al (O H) 3 + 50 μ l N S( 100 mg/ L ) 混懸液 ; 對照組給予 200 μ l N S 。 實驗第 28 天 、 第 29 天和第 30 天行滴鼻激發 ; 模型組每次給予50 μ l OV A2 N S ( 2 g/ L ) 滴鼻 ,對照組給予 50 μ l N S 。
    氣道反應性的檢測
    實驗第 32 天 , 首先 , 連接好 B u xco **并定標 。將自然狀態下的 BALB/ c 小鼠置入體描箱中 ,先測定基礎 Pe n h 值 ; 隨后用 Mc h 激發 , 濃度由低到高依次為 0 、 0 . 20 、 0 . 39 、 0 . 78 、 1 . 56 、 3 . 12 、 6 . 25 、12 . 5 、 25 和 50 g/ L ,記錄此時的 Pe n h 值 ,每次霧化吸入 2 mi n ,記錄3 mi n 。 有創組則是將小鼠行*后用 B u xco 有創*測定其 RL 值 。
    氣道反應性檢測后行支氣管肺泡灌洗 ( PB S 0 . 8 ml × 3 次) , 回收支氣管肺泡灌洗液 , 離心 , 細胞沉淀重懸 ,取部分計算細胞總數 ,余下部分制備涂片 , H E 染色后行細胞分類計數 , 每張涂片計數 400 個細胞 , 記錄各種細胞數目。
    實驗結果以 ? x ±s 表示為進行*組和有創組氣道反應性相關分析，分別將每個 Mc h 激發濃度下的Pe n h 與 RL 組轉換為與 N S 激發的基礎值的百分比 ( Mc h 激發的 Pe n h 值或 RL 值/ N S 激發的 Pe n h 值或 RL值 × 100 %) 來表示 。 采用 SPSS 11 . 0統計軟件分析 ,兩組樣本均數進行 t 檢驗或相關分析 , P < 0 . 05 、P <0 . 01表示差異有統計學意義 。