PA317細胞,逆轉錄病毒包裝的NIH3T3細胞 返回列表頁

上海博研生物*的“PA317細胞,逆轉錄病毒包裝的NIH3T3細胞”供應商，保證細胞質量，提供細胞的報價，咨詢。 咨詢選購。

產品名稱：PA317細胞,逆轉錄病毒包裝的NIH3T3細胞 

產品用途：科研
保證運輸中細胞的正常生長，關于其價格、報價、貨期，請咨詢我們。
產品特點：活性好、存活率高、實驗成果特征明顯
產品來源：人組織、小鼠組織、大鼠組織、兔組織等動物組織
產品運輸：免費快遞
產品包裝：瓶裝
產品用途：細胞培養研究
下面是有關細胞株，菌株培養的具體無菌技術：
1. 實驗進行前，無菌室及無菌操作臺（laminar flow） 以紫外燈照射30-60 分鐘滅菌，以70 % ethanol 擦拭無菌操作臺面，并開啟無菌操作臺風扇運轉10 分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，且即使培養基相同亦不共享培養基，以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以70 % ethanol 擦拭無菌操作臺面。操作間隔應讓無菌操作臺運轉10分鐘以上后，再進行下一個細胞株的操作。
2. 無菌操作工作區域應保持清潔及寬敞，必要物品，例如試管架、吸管、吸取器或吸管盒等可以暫時放置，其它實驗用品用完即應移出，以利于氣流之流通。實驗用品以70 % ethanol 擦拭后才帶入無菌操作臺內。實驗操作應在臺面的*無菌區域，勿在邊緣的非無菌區域操作。
3. 小心取用無菌的實驗物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或容器瓶口，亦不要在打開的容器正上方操作實驗。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約45° 角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。
4. 工作人員應注意自身的安全，須穿戴實驗衣及手套后才進行實驗。對于來自人類或是病毒感染的細胞株應特別小心操作，并選擇適當等級的無菌操作臺（至少Class II）。操作過程中，應避免引起aerosol 的產生，小心毒性藥品，例如DMSO 及TPA 等，并避免尖銳針頭的傷害等。
5. 定期檢測下列項目：
5.1. CO2 鋼瓶的CO2 壓力
5.2. CO2 培養箱的CO2 濃度、溫度、及水盤是否有污染（水盤的水用無菌水，每周更換）。
5.3. 無菌操作臺內的airflow 壓力，定期更換紫外線燈管及HEPA 過濾膜，預濾網（300小時/預濾網，3000 小時/HEPA）。
6. 水槽可添加消毒劑（Zephrin 1:750），定期更換水槽的水。

PA317細胞,逆轉錄病毒包裝的NIH3T3細胞傳代方法：細胞*匯合時，倒掉舊液，加入消化液（0.25%*+0.03%EDTA）2ml消化，顯微鏡下觀察細胞*脫離瓶壁分離成單個細胞后棄掉*，加培養基混勻分瓶，T25瓶中加培養基至6-8ml，T75瓶加培養基至20ml，37℃，5%CO2孵箱培養。
郵購備注： 收到細胞后，請鏡下觀察細胞，用恰當方式處理細胞。若有懸浮的細胞，請離心收集細胞，接種到一個新的培養瓶中。使用新鮮配制的培養基，使用進口胎牛血清，剛接到細胞時血清濃度可以在15％。本產品經過了細菌、真菌、霉菌、病毒（HIV、HBV、HCV）、支原體檢測。
我們將為客服提供全面的細胞計數、細胞染色、（MTT）比色法、細胞培養、細胞污染、常規生物材料細胞毒性實驗等等細胞實驗技術服務。
細胞復蘇的原則－快速融化：必須將凍存在-196℃液氮中的細胞快速融化至37℃，使細胞外凍存時的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時進入細胞形成再結晶，對細胞造成損害。
具體操作 （一）實驗前準備： 1．將水浴鍋預熱至37℃ 2．用75％酒精擦拭紫外線照射30min的超凈工作臺臺面。 3．在超凈工作臺中按次序擺放好消過毒的離心管、吸管、培養瓶等等。
（二）取出凍存管： 1．根據細胞凍存記錄按標簽找到所需細胞的編號。 2．從液氮罐中取出細胞盒，取出所需的細胞，同時核對管外的編號。
（三）迅速解凍： 1．迅速將凍存管投入到已經預熱的水浴鍋中迅速解凍，并要不斷的搖動，使管中的液體迅速融化。 2．約1-2min后凍存管內液體*溶解，取出用酒精棉球擦拭凍存管的外壁，再拿入超凈臺內。
（四）平衡離心：用架盤天平平衡后，放入離心機中3000r/min 離心3min。
（五）制備細胞懸液： 1．吸棄上清液。 2．向離心管內加入10ml培養液，吹打制成細胞懸液。 （六）細胞計數： 細胞濃度以5×105/ml為宜。
（七）培養細胞 將復合細胞計數要求的細胞懸液分裝入培養瓶內，將培養瓶放入37℃和5％CO2的培養箱內2-4小時（或者24-48小時）后換液繼續培養培養，換液的時間由細胞情況而定。
初學者易犯錯誤： 1．水浴鍋未預熱或者未預熱到37℃。 2．水浴鍋內凍存管太多，導致傳熱不佳，使融化時間延長。 3．離心前忘記平衡，導致離心機損壞和細胞丟失。 4．一次復蘇細胞過多，忘記更換吸頭和吸管，導致細胞交叉污染。
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