NCI-H1299細胞，NCI-H1299細胞 返回列表頁

上海博研生物*的“NCI-H1299細胞，人非小細胞肺癌細胞”代理商，提供細胞的報價，咨詢。 咨詢選購。
產(chǎn)品名稱：NCI-H1299細胞，NCI-H1299細胞
產(chǎn)品用途：科研
保證運輸中細胞的正常生長，關(guān)于其價格、報價、貨期，請咨詢我們。
產(chǎn)品特點：活性好、存活率高、實驗成果特征明顯
產(chǎn)品來源：人組織、小鼠組織、大鼠組織、兔組織等動物組織
產(chǎn)品運輸：免費快遞
產(chǎn)品包裝：瓶裝
產(chǎn)品用途：細胞培養(yǎng)研究
細胞周期的DNA檢測
　?、?、樣品準備　準備以下一種或幾種樣品
　　A、組織單細胞懸浮液（如淋巴腺、脾、骨髓、胎盤細胞）
        B、組織培養(yǎng)細胞
　　C、Ficoll-hypaque分離的單核細胞
　?、?、反應體系－DNA低滲緩沖液
　　檸檬酸三鈉 0.25g
　　Triton-X 100 0.75ml
　　Propidium iodide 0.025g
　　核糖核酸酶　0.005g
　　蒸餾水　250ml
　　我們將該DNA低滲溶液于密閉瓶子中存放數(shù)月后并無發(fā)現(xiàn)有任何染色活性的丟失
　?、?、染色
　　1、 每一個管子中放入1×106個細胞；
　　2、 樣品離心后盡可能*地移去上清液，并且不要打碎沉淀塊； 　　 3、 入1ml的DNA低滲染色（可用甲基綠進行染色）緩沖液至沉淀中，并混勻；
　 4、 樣品于4℃下避光30分鐘或zui長不超過1個小時以備流式細胞儀分析 。 　
　注意：延長在低滲緩沖液的曝光時間會引起樣品碎片的增加
NCI-H1299細胞，NCI-H1299細胞傳代方法：細胞*匯合時，倒掉舊液，加入消化液（0.25%*+0.03%EDTA）2ml消化，顯微鏡下觀察細胞*脫離瓶壁分離成單個細胞后棄掉*，加培養(yǎng)基混勻分瓶，T25瓶中加培養(yǎng)基至6-8ml，T75瓶加培養(yǎng)基至20ml，37℃，5%CO2孵箱培養(yǎng)。
郵購備注： 收到細胞后，請鏡下觀察細胞，用恰當方式處理細胞。若有懸浮的細胞，請離心收集細胞，接種到一個新的培養(yǎng)瓶中。使用新鮮配制的培養(yǎng)基，使用進口胎牛血清，剛接到細胞時血清濃度可以在15％。本產(chǎn)品經(jīng)過了細菌、真菌、霉菌、病毒（HIV、HBV、HCV）、支原體檢測。
我們將為客服提供全面的細胞計數(shù)、細胞染色、（MTT）比色法、細胞培養(yǎng)、細胞污染、常規(guī)生物材料細胞毒性實驗等等細胞實驗技術(shù)服務。
細胞復蘇的原則－快速融化：必須將凍存在-196℃液氮中的細胞快速融化至37℃，使細胞外凍存時的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時進入細胞形成再結(jié)晶，對細胞造成損害。
具體操作 （一）實驗前準備： 1．將水浴鍋預熱至37℃ 2．用75％酒精擦拭紫外線照射30min的超凈工作臺臺面。 3．在超凈工作臺中按次序擺放好消過毒的離心管、吸管、培養(yǎng)瓶等等。
（二）取出凍存管： 1．根據(jù)細胞凍存記錄按標簽找到所需細胞的編號。 2．從液氮罐中取出細胞盒，取出所需的細胞，同時核對管外的編號。
（三）迅速解凍： 1．迅速將凍存管投入到已經(jīng)預熱的水浴鍋中迅速解凍，并要不斷的搖動，使管中的液體迅速融化。 2．約1-2min后凍存管內(nèi)液體*溶解，取出用酒精棉球擦拭凍存管的外壁，再拿入超凈臺內(nèi)。
（四）平衡離心：用架盤天平平衡后，放入離心機中3000r/min 離心3min。
（五）制備細胞懸液： 1．吸棄上清液。 2．向離心管內(nèi)加入10ml培養(yǎng)液，吹打制成細胞懸液。 （六）細胞計數(shù)： 細胞濃度以5×105/ml為宜。
（七）培養(yǎng)細胞 將復合細胞計數(shù)要求的細胞懸液分裝入培養(yǎng)瓶內(nèi)，將培養(yǎng)瓶放入37℃和5％CO2的培養(yǎng)箱內(nèi)2-4小時（或者24-48小時）后換液繼續(xù)培養(yǎng)培養(yǎng)，換液的時間由細胞情況而定。
初學者易犯錯誤： 1．水浴鍋未預熱或者未預熱到37℃。 2．水浴鍋內(nèi)凍存管太多，導致傳熱不佳，使融化時間延長。 3．離心前忘記平衡，導致離心機損壞和細胞丟失。 4．一次復蘇細胞過多，忘記更換吸頭和吸管，導致細胞交叉污染。
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