小鼠血小板活化因子（PAF）ELISA試劑盒供應 返回列表頁

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【產品名稱】： 小鼠血小板活化因子（PAF）ELISA試劑盒供應
【英文名稱】： Mouse plaet activating factor,PAF ELISA KIT
【方        法】： 酶聯免疫法/酶免法（ELISA）
【產品貨號】： BYS12759B
【規        格】： 96T/48T
【標        本】： 血清、血漿、細胞培養上清液、組織勻漿、組織液、尿液、分泌物等
【保存條件】： 2-8℃
【有 效 期】： ６個月
【運輸條件】： 低溫運輸，用干冰或者冰袋低溫運輸。

小鼠血小板活化因子（PAF）ELISA試劑盒供應操作步驟
方法一　用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:
　　1.　包被：用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1～10μg／ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml，4℃過夜。次日，棄去孔內溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。（簡稱洗滌，下同）。
　　2.　加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中，置37℃孵育1小時。然后洗滌。（同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔）。
　　3.　加酶標抗體：于各反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標抗體（經滴定后的稀釋度）0.1ml。37℃孵育0.5～1小時，洗滌。
　　4.　加底物液顯色：于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分鐘。
　　5.　終止反應：于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。
　　6.　結果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結果：反應孔內顏色越深，陽性程度越強，陰性反應為無色或極淺，依據所呈顏色的深淺，以“+"、“-"號表示。也可測O•D值：在ELISA檢測儀上，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處，以空白對照孔調零后測各孔O•D值，若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。
　　方法二　用于檢測未知抗體的間接法：　　　
　　用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg／ml，每孔加0.1ml，4℃過夜。次日洗滌3次。加一定稀釋的待檢樣品（未知抗體）0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。（同時做空白、陰性及陽性孔對照）于反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標第二抗體（抗抗體）0.1ml，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。其余步驟同“雙抗體夾心法"的4、5、6。

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