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背景介紹:Component of a nuclear TRAMP-like complex, an ATP-dependent exosome regulatory complex consisting of an helicase (SKIV2L2/MTR4), an oligadenylate polymerase (PAPD5 or PAPD7), and a substrate specific RNA-binding factor (ZCCHC7 or ZCCHC8). Several TRAMP-like complexes exist with specific compositions and are associated with nuclear, or nucleolar RNA exosomes. Identified in the spliceosome C complex.
別名:DKFZp434E2220; ZCCHC8; ZCHC8_HUMAN; Zinc finger CCHC domain containing 8; Zinc finger CCHC domain containing protein 8; Zinc finger CCHC domain-containing protein 8.
ZCCHC8蛋白抗體,Anti-ZCCHC8抗體簡單介紹:
產品編號:BYK-18557R
英文名稱:Anti-ZCCHC8
中文名稱:ZCCHC8蛋白抗體
產品規格:50ul;100ul;200ul;1ml,*
抗體來源 Rabbit or Mouse
克隆類型 Polyclonal or Monoclonal
交叉反應、產品應用 (具體交叉反應與產品應用請或添加客服直接索取)
性 狀 Lyophilized or Liquid
濃 度 1mg/ml
ZCCHC8蛋白抗體,Anti-ZCCHC8抗體產品信息:
Western Blotting 具體實驗步驟
Western,也稱Western blot、Western blotting、Western 印跡,是用抗體檢測蛋白的重要方法之一。
Western可以參考如下步驟進行操作:
2、電泳(Electrophoresis)
(1)、SDS-PAGE凝膠配制
SDS-PAGE凝膠可以參考一些文獻資料進行配制,也可以使用上海博研生物的SDS-PAGE凝膠配制試劑盒。該試劑盒提供了除水和配膠器具外的所有試劑以及配制各種濃度SDS-PAGE的配方。
(2)、樣品處理
在收集的蛋白樣品中加入適量濃縮的SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液。例如2X或5X的SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液。使用5X的SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液可以減小上樣體積,在相同體積的上樣孔內可以上樣更多的蛋白樣品。5X的SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液可以參考相關文獻資料配制,也可以使用上海博研生物的SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液(5X) 。100℃或沸水浴加熱3-5分鐘,以充分變性蛋白。
(3)、上樣與電泳
冷卻到室溫后,把蛋白樣品直接上樣到SDS-PAGE膠加樣孔內即可。為了便于觀察電泳效果和轉膜效果,以及判斷蛋白分子量大小,使用預染蛋白質分子量標準。
電泳時通常*在上層膠時使用低電壓恒壓電泳,而在溴酚藍進入下層膠時使用高電壓恒壓電泳。對于Bio-Rad的標準電泳裝置或類似電泳裝置,低電壓可以設置在80-100V,高電壓可以設置在120V左右。SDS-PAGE可以采用普通的電泳儀就可以滿足要求。為了電泳方便起見,也可以采用整個SDS-PAGE過程恒壓的方式,通常把電壓設置在100V,然后設定定時時間為90-120分鐘。設置定時可以避免經常發生的電泳過頭。
通常電泳時溴酚藍到達膠的底端處附近即可停止電泳,或者可以根據預染蛋白質分子量標準的電泳情況,預計目的蛋白已經被適當分離后即可停止電泳。
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