大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α（TGF-α）ELISA試劑盒*

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實(shí)驗(yàn)原理

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α（TGF-α）水平。用純化的大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α（TGF-α）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α（TGF-α），再與HRP標(biāo)記的轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α（TGF-α）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α（TGF-α）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α（TGF-α）濃度。

試劑盒組成

1	30倍濃縮洗滌液	20ml×1瓶	7	終止液	6ml×1瓶
2	酶標(biāo)試劑	6ml×1瓶	8	標(biāo)準(zhǔn)品（9600 ng/L）	0.5ml×1瓶
3	酶標(biāo)包被板	12孔×8條	9	標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液	1.5ml×1瓶
4	樣品稀釋液	6ml×1瓶	10	說(shuō)明書(shū)	1份
5	顯色劑A液	6ml×1瓶	11	封板膜	2張
6	顯色劑B液	6ml×1/瓶	12	密封袋	1個(gè)

大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α（TGF-α）ELISA試劑盒*

操作步驟

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。

4800 ng/L	5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品	150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2400 ng/L	4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品	150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1200 ng/L	3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品	150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
600 ng/L	2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品	150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
300 ng/L	1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品	150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α（TGF-α）ELISA試劑盒*相關(guān)產(chǎn)品：

BYS10275B 人紅細(xì)胞刺激因子（ESF）ELISA試劑盒
BYS10276B 人基質(zhì)裂解素（ST1）ELISA試劑盒
BYS10277B 人基質(zhì)裂解素（ST2）ELISA試劑盒
BYS10278B 人基質(zhì)裂解素（ST3）ELISA試劑盒
BYS10279B 人破骨細(xì)胞分化因子（ODF）ELISA試劑盒
BYS10280B 人腫瘤壞死因子相關(guān)激活誘導(dǎo)因子（TRANCE）ELISA試劑盒
BYS10281B 人生長(zhǎng)激素釋放因子（GH-RF）ELISA試劑盒
BYS10282B 人α/β干擾素受體（IFN-α/βR）ELISA試劑盒
BYS10283B 人B細(xì)胞生長(zhǎng)因子（BCGF）ELISA試劑盒
BYS10284B 人B細(xì)胞分化因子（BCDF）ELISA試劑盒
BYS10285B 人心納素（ANF）ELISA試劑盒
BYS10286B 人纖溶酶原激活劑（PLGA）ELISA試劑盒
BYS10287B 人上皮細(xì)胞粘附分子（Ep-CAM/CD362）ELISA試劑盒
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BYS10289B 人生長(zhǎng)調(diào)節(jié)致癌基因β/黑素瘤生zhang刺激因子（GROβ/CXCL2/MGSA）ELISA試劑盒
BYS10290B 人神經(jīng)趨化蛋白（fractalkine/CX3CL1）ELISA試劑盒
BYS10291B 人B-淋巴細(xì)胞趨化因子1（BLC-1/CXCL13）ELISA試劑盒
BYS10292B 人B細(xì)胞連接蛋白（BLNK）ELISA試劑盒
BYS10293B 人表皮細(xì)胞活化肽因子（CAPF）ELISA試劑盒
BYS10294B 人巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體（M-CSFR）ELISA試劑盒

大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α（TGF-α）ELISA試劑盒*

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