用氯化銫離心法純化噬菌體

[器材和試劑]
● L8—M Beckman超速離心機或與其相當的機型
● 吊桶式SWTi4l轉頭或相當類型
● 氯化銫（Sigma）
● PBS
● 純化的噬菌體樣本

[方法]
1．在每毫升后的噬菌體懸液（例如來自實驗方案13．11）中，加入0．45 g氯化銫，充分混勻至溶解。
2．用吊桶式轉頭 （或與其相當的型號） 離心溶液，15℃17h，噬菌體將濃縮在組分1和組分2中（。組分1的濃度較高，但組分2的體積較大。用巴氏滴管或塑料注射器吸取這些組分。如果是*次使用本實驗方案，那么先收集所有條帶并分別對其檢測將是明智之舉。
3．將收獲的溶液對PBS透析過夜。
4．通過感染大腸桿菌DH5cF，或TGl滴定各個不同組分中噬菌體，并保存滴度高的組分。通常，噬菌體會集中在1個區帶內，而較少的數量會分散在其他區帶（如果可見）。加入甘油至10％；按每份樣本1013個噬菌體等量分裝并儲存于-80℃。更進一步的質量控制則可進行蛋白雜交印跡，采用抗標簽抗體或抗pⅢ抗體。

用氯化銫純化噬菌粒。
離心后離心管外觀如圖示。噬菌體主要濃縮于碎片樣區帶（組分1）和其下的乳白色區帶（組分2）。兩條區帶均需收集