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    單克隆抗體的概念和原理

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    一、單克隆抗體的概念和原理

      免疫反應(yīng)是人類(lèi)對(duì)疾病具有抵抗力的重要因素。當(dāng)動(dòng)物體受抗原刺激后可產(chǎn)生抗體。抗體的特異性取決于抗原分子的決定簇,各種抗原分子具有很多抗原決定簇,因此,免疫動(dòng)物所產(chǎn)生的抗體實(shí)為多種抗體的混合物。用這種傳統(tǒng)方法制備抗體效率低、產(chǎn)量有限,且動(dòng)物抗體注入人體可產(chǎn)生嚴(yán)重的過(guò)敏反應(yīng)。此外,要把這些不同的抗體分開(kāi)也極困難。近年,單克隆抗體技術(shù)的出現(xiàn),是免疫學(xué)領(lǐng)域的重大突破。

      (1)單克隆抗體的基本概念 抗體主要由B淋巴細(xì)胞合成。每個(gè)B淋巴細(xì)胞有合成一種抗體的遺傳基因。動(dòng)物脾臟有上百萬(wàn)種不同的B淋巴細(xì)胞系,含遺傳基因不同的B淋巴細(xì)胞合成不同的抗體。當(dāng)機(jī)體受抗原刺激時(shí),抗原分子上的許多決定簇分別激活各個(gè)具有不同基因的B細(xì)胞。被激活的B細(xì)胞分裂增殖形成該細(xì)胞的子孫,即克隆由許多個(gè)被激活B細(xì)胞的分裂增殖形成多克隆,并合成多種抗體。如果能選出一個(gè)制造一種專(zhuān)一抗體的細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),就可得到由單細(xì)胞經(jīng)分裂增殖而形成細(xì)胞群,即單克隆。單克隆細(xì)胞將合成一種決定簇的抗體,稱(chēng)為單克隆抗體。

      (2)單克隆抗體技術(shù)的基本原理 要制備單克隆抗體需先獲得能合成專(zhuān)一性抗體的單克隆B淋巴細(xì)胞,但這種B淋巴細(xì)胞不能在體外生長(zhǎng)。而實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)骨髓瘤細(xì)胞可在體外生長(zhǎng)繁殖,應(yīng)用細(xì)胞雜交技術(shù)使骨髓瘤細(xì)胞與免疫的淋巴細(xì)胞二者合二為一,得到雜種的骨髓瘤細(xì)胞。這種雜種細(xì)胞繼承兩種親代細(xì)胞的特性,它既具有B淋巴細(xì)胞合成專(zhuān)一抗體的特性,也有骨髓瘤細(xì)胞能在體外培養(yǎng)增殖永存的特性,用這種來(lái)源于單個(gè)融合細(xì)胞培養(yǎng)增殖的細(xì)胞群,可制備抗一種抗原決定簇的特異單克隆抗體。

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    各種動(dòng)物血清:內(nèi)皮細(xì)胞血清、HyClone、GIBCO胎牛血清。

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    細(xì)胞:*細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、腫瘤耐藥細(xì)胞

    耗材:細(xì)胞培養(yǎng)耗材、普通實(shí)驗(yàn)耗材。

    生化試劑:*生化試劑、進(jìn)口分裝生化試劑。 

     

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