小鼠腫瘤壞死因子α ELISA試劑盒使用說明

               小鼠腫瘤壞死因子α ELISA試劑盒使用說明

【產品用途】：被測樣品定性定量分析

【產品規(guī)格】：96T/48T（兩種規(guī)格）

【檢測方法】：酶免法/酶聯(lián)免疫法（ELISA）

【保存條件】：2-8℃

【供 貨 期】：1-3天（現(xiàn)貨供應）

【產品性狀】：液體盒裝

檢測原理：采用雙抗體夾心ABC-ELISA法,保存條件:2-8℃,公司提供代測服務，。

檢測范圍：                                                          96T

3pg/ml-160pg/ml

標本要求

1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融

2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

試劑盒組成

原理
本實驗采用ABC-HRP方法。用抗大鼠IFN-r單抗包被于酶標板上，標準品和樣品中的IFN-r與單抗結合，高靈敏檢測樣品中IFN-r的含量。 

準備試劑與收集血樣

1. 洗滌液：用重蒸水1:25稀釋

2. 收集血液標本：采集血清盡早檢測，2-8oC保存一天；需更長時間須冷凍（-20 oC）保存，避免反復凍融。

檢測程序

1. 建立標準曲線：設標準孔8孔，每孔中各加入樣品稀釋液100ul，*孔加標準品100ul，混勻后用加樣器吸出100ul，移至第二孔。如此反復作對倍稀釋至第六孔，zui后，從第六孔中吸出100ul棄去。第七孔為空白對照，第八孔為零孔。

2. 加樣：待測品孔每孔各加入待測樣品100ul混勻。

3. 將反應板充分混勻后粘上封板紙置37 oC 120分鐘。

4. 洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次，向濾紙上印干。

5. 每孔（除零孔）加*抗體工作液50ul，置37℃ 60分鐘。

6. 洗板：同前。

7. 每孔（除零孔）加酶標抗體工作液100ul（兩滴），將反應板置37 oC 60分鐘。

8. 洗板：同前。

9. 每孔加入底物液A、B各一滴，置37 oC避光反應15分鐘。

10. 每孔加入1滴終止液混勻。

11. 在450nm處測吸光值。

結果計算與判斷

1. 所有OD值都應減除零孔值后再行計算。

2. 以標準品500、250、125、62.5、31.3、15.6、0 pg/ml之OD值在雙對數(shù)紙上作圖，畫出標準曲線。通過標本的OD值可以在標準曲線上查出其濃度。或使用計算機軟件，繪制出標準曲線，計算樣品含量。

注意事項

1. 以上標準孔及待查樣品均建議做復孔，每次測定應同時制作標準曲線。

2. 本試劑盒宜置4oC冰箱保存。有效期6個月。

3. 本試劑盒取出的試劑在室溫條件下使用，溶液應輕輕搖勻后使用。

4. 本試劑盒含2M硫酸，不要將它與含*的廢物混在一起。

5. 板條開封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。

6. 本試劑盒僅供研究用。