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大鼠α平滑肌肌動蛋白（α-SMA）ELISA試劑盒操作步驟

時間：2011/3/9閱讀：621

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大鼠α平滑肌肌動蛋白（α-SMA）ELISA試劑盒操作步驟

檢測范圍： 96T

2.5ng/ml-80ng/ml

使用目的：

大鼠α平滑肌肌動蛋白（α-SMA）ELISA試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關液體樣本中α平滑肌肌動蛋白（α-SMA）含量。

操作步驟

1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

80ng/ml	5號標準品	150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
40ng/ml	4號標準品	150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
20ng/ml	3號標準品	150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
10ng/ml	2號標準品	150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
5ng/ml	1號標準品	150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液

2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。

11. 測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

保存條件及有效期

1．大鼠α平滑肌肌動蛋白（α-SMA）ELISA試劑盒保存：；2-8℃。

2．有效期：6個月

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