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    技術文章

    Flag抗體試驗問題集錦

    閱讀:741發布時間:2013-9-22

    Flag標簽系統是已被*的用于表達、純化以及檢測融合蛋白的表達系統,廣泛應用于Western blotting、免疫細胞組化、免疫共沉淀、流式細胞術、蛋白純化以及蛋白相互作用、蛋白分離等多個研究領域。Flag標簽是一個與重組蛋白相融合的由 8個親水氨基酸(DYKDDDDK)組成的多肽片斷。Flag標簽只有8個氨基酸組成,因此它不會占據其他表位與結合域,避免導致融合蛋白的功能、分泌性以及轉運發生改變。由于它的親水性特點,Flag標簽傾向于定位在融合蛋白表面,因此更易與抗體結合以及被腸激酶酶解。

    如何選擇合適的Flag標簽抗體?

    我們在選擇Flag抗體時,主要根據自己的需要,特別是實驗應用上的需要。另外,一個抗體檢測后的應用類型越多,在使用過程中的選擇余地就越大;而小鼠源的單克隆抗體一般在特異性、穩定性以及效價都要優于多克隆抗體。 另外,抗體的效價也是考察該抗體性價比的重要方面,也即相當于實際應用時的稀釋比率。一個效價高的100μl Flag抗體(假如其WB檢測的稀釋比率是1:5000,終使用液相當于500ml),要比效價低的1ml的Flag抗體(假如WB檢測的稀釋比率是 1:200,終使用液相當于2ml)性價比更高。

     

    Abbkine的Flag標簽抗體的效價有點超出意料。做WB實驗時,*次按照說明書推薦的1:1000,顯示的條帶很強,后來不斷的稀釋摸索條件,1:10000稀釋的時候做WB條帶仍然是很不錯的。 ——中山大學醫學部一客戶

     

     
    產品名稱及描述品牌貨號產品說明
    Anti-Flag Tag Mouse Monoclonal Antibody (1B10)AbbkineA02010詳情
    Anti-Flag Tag Rabbit Polyclonal AntibodyAbbkineA02011詳情
    HRP Conjugated Anti-Flag Tag Monoclonal Antibody (1B10)AbbkineA02015詳情

     

     

    為什么推薦Abbkine品牌的Flag抗體?

    Flag系統是Sigma-Aldrich®擁有的系統,因此Sigma的Flag標簽抗體是之前諸多客戶的選擇。Sigma的Flag標簽抗體主要有M1和M2兩種克隆號的抗體,其中M1克隆號的Flag抗體可用于檢測Flag標簽位于N末端的重組蛋白,而M2克隆號的Flag單克隆抗體則可以檢測幾乎所有的Flag標簽蛋白。其2010年的中國報價分別為¥4649/200μg和¥3683/200μg。

    假如您想選擇一款性價比更高的Flag標簽抗體,那Abbkine可能是另一個優先選擇,其價格比Sigma要低30%左右。Abbkine的Flag標簽抗體 Anti-Flag Tag Monoclonal Antibody(貨號#A02010)可以用于檢測和Flag標簽融合表達蛋白的表達、細胞內定位,以及純化、定性或定量檢測Flag融合表達蛋白(包括N末端、C末端)等。該Flag抗體為小鼠源單克隆抗體,其免疫原為KLH偶聯的Flag標簽(DYKDDDDK)多肽。另外,Abbkine還同時提供經HRP偶聯的Flag標簽抗體,尤其適合IP-WB驗證時去除二抗的干擾;兔源多克隆Flag抗體也為客戶提供另一種Flag標簽的檢測方案。

     

     
    產品名稱及描述品牌貨號產品說明
    Anti-Flag Tag Mouse Monoclonal Antibody (1B10)AbbkineA02010詳情
    Anti-Flag Tag Rabbit Polyclonal AntibodyAbbkineA02011詳情
    HRP Conjugated Anti-Flag Tag Monoclonal Antibody (1B10)AbbkineA02015詳情

     

     

    Abbkine的Flag單克隆標簽抗體不僅能應用于細胞內定位的IF實驗,同樣還能應用于IP實驗。1:200甚至更高的IP實驗稀釋比率,也說明了該抗體本身的具有很高的效價,同時,因為是單克隆抗體,因此特異性也很高。價所對應的高稀釋比率也意味著高性價比。對于WB實驗,其說明書的推薦起始稀釋比例是1:1000,但在在1:5,000的稀釋比率下也表現優異(Abbkine也進行了10,000次以后的稀釋,仍然顯示出很好的條帶顯示,沒有在說明書里列出)。下圖為Abbkine的Flag抗體的應用圖示。

     

    幻燈顯示

    點擊圖片查看Flag標簽抗體更詳細信息

     

     

    一個價的抗體不僅影響實驗結果的靈敏度,還意味著更高的性價比。Abbkine的Flag標簽抗體(貨號#A02010)在常規的WB實驗里, 推薦的起始稀釋比率為1:1000,實際在Abbkine的應用中,還有1:10,000甚至更高的稀釋比率,需要根據客戶具體的實驗條件進行進行優化。

    Abbkine還提供大包裝1ml的Flag標簽抗體,非常適合經常進行His標簽系統免疫學檢測的實驗需求。為方便客戶的使用, 上述產品,Abbkine均在中國備有現貨。Abbkine針對中國市場,提供化的產品質量追蹤和售后服務以及保障,如果您在使用過程中有任何問題, 請直接與其當地代理商艾美捷科技有限公司。

     

    產品名稱及描述品牌貨號產品說明
    Anti-Flag Tag Mouse Monoclonal Antibody (1B10)AbbkineA02010詳情
    Anti-Flag Tag Rabbit Polyclonal AntibodyAbbkineA02011詳情
    HRP Conjugated Anti-Flag Tag Monoclonal Antibody (1B10)AbbkineA02015詳情

     

     

    美國Abbkine品牌是一家提供高性價比免疫學和細胞學科研產品及解決方案的品牌,艾美捷將其引入中國,作為其中國區域代理,將為客戶提供的常規免疫學試劑,如各種標簽抗體、內參抗體、常規一抗以及全系列二抗,抗體檢測底物以及相關試劑盒等。同時我們作為多家品牌的的中國代理或 區域代理,艾美捷能為您提供系列的實驗室解決方案。如果您對上述產品感興趣,請致電* 轉801/802/803  或者/4876 到艾美捷科技有限公司垂詢相關的產品信息及完整實驗解決方案


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