GENOMIC小鼠Ⅰ型膠原C端肽（CTX-Ⅰ）試劑盒介紹

GENOMIC品牌專業生產ELISA試劑盒，由于采用完整的德國生產工藝和*的抗體，其試劑盒具有以下幾個方面的特點:

一、、靈敏、特異的抗體；

二、穩定的重復性和可靠性；

三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；

四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養上清液、尿液等等多種標本類型；

五、性價比非常好，節省實驗經費。

本試劑盒用于測定小鼠血清、血漿及相關液體樣本中Ⅰ型膠原C端肽（CTX-Ⅰ）含量。

實驗原理

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠Ⅰ型膠原C端肽（CTX-Ⅰ）水平。用純化的小鼠Ⅰ型膠原C端肽（CTX-Ⅰ）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入Ⅰ型膠原C端肽（CTX-Ⅰ），再與HRP標記的Ⅰ型膠原C端肽（CTX-Ⅰ）抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的Ⅰ型膠原C端肽（CTX-Ⅰ）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中小鼠Ⅰ型膠原C端肽（CTX-Ⅰ）濃度。 

試劑盒組成 

標本要求 

1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融

2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

操作步驟

• 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

• 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
• 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
• 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
• 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
• 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。 
• 溫育：操作同3。
• 洗滌：操作同5。
• 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
• 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
• 測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。