小鼠生長激素(GH)ELISA試劑盒檢測生長激素缺乏癥相關表達和對免疫的影響
生長激素缺乏癥(GHD)是指生長激素分泌功能障礙所致的生長遲緩,是一種嚴重影響兒童青少年身心健康的疾病.據報道患病率大約是1/4000~1/15000.GHD的病因可劃分為特發性和器質性兩種.隨著內分泌診斷技術和影像學檢查技術的高速發展,對GHD病因的認識也逐漸發生了變化,主要提出了兩種假說,即所謂"損傷學說"和"發育異常學說".該研究的目的在于分析GHD的病因譜,分析這些病因對下丘腦垂體結構的影響作用以及與臨床表現的關系,分析基因異常在GHD發病機制中的作用.GHD的病因多種多樣,具有一定的異質性.除少數是有明確的器質性中樞神經系統病變外,絕大多數為特發性.特發性GHD中,圍產期異常是重要的致下丘腦垂體損傷的原因,但不能除外其它因素的作用,如胚胎發育過程中的異常等.圍產期異常可能是通過造成垂體柄斷裂來影響垂體的多種內分泌功能.在特發性的GHD中,極少數病例是由于GH-N基因異常而造成的.因此對于GHD的病因的研究有待于進一步的深入,特別是對于下丘腦垂體的胚胎發育的調控基因/因子,如Pit-1轉錄因子等進行研究.
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人生長激素(human growth hormone,hGH)基因在小鼠體內的表達和持續時間以及表達的生長激素對小鼠血清中IL-2、IFN-γ和TNF-α濃度的影響.方法 1.構建真核細胞高表達hGH基因的重組質粒pcDNA3-hGH,并對所構建的重組質粒進行內切酶圖譜鑒定和序列分析.2.通過脂質體介導將含hGH的重組質粒pcDNA3-hGH轉染入COS-1細胞中,通過免疫組化和ELISA的方法對COS-1細胞和培養上清中的hGH進行了觀察,并用Jurkat細胞增殖法檢測重組質粒表達蛋白的生物學活性.3.將重組質粒pcDNA3-hGH直接注射于小鼠股四頭肌中,于注射后第5、15、25、40、60天從眼眶取血,分離血清,用ELISA方法檢測血清中GH、IL-2、IFN-γ和TNF-α的水平;同時取注射處的骨骼肌組織進行免疫組化染色以鑒定hGH的表達.
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