抗體保存指南

抗體保存指南

1. 收到抗體后請務必在12000rpm離心1-5分鐘后再打開管蓋進行分裝和保存（如果抗體體積小于50ul，請延長離心時間至5分鐘，以保證全部抗體均離心下來）！

2. 對于Abcam大部分抗體，比較合適的保存方式是分裝后保存在 -20℃ or -80℃ 。

對絕大多數抗體來說，保存在-20℃是*足夠了。沒有任何證據顯示保存在-80℃會有更多的好處！
分裝可以zui大程度的降低反復凍融對抗體活性的損害，同時也降低了由于多次從同一管中吸取抗體造成的污染可能性。
分裝的量以一次實驗用完為好，zui少不能少于10ul每份。因為分裝體積越小，抗體的濃度越可能會受到蒸發以及管壁吸附的影響
復融后的分裝抗體如果一次用不完，將剩余母液保存在4℃，避免再凍起來！
抗體工作液應該當天配制當天用完，在4℃ 盡量不要超過1天。
避免將抗體保存在自動除霜冰箱中。盡量將抗體保存在冰箱里層，而不是門上
 

3. 大部分抗體收到后4℃短暫保存1-2周對抗體活性是沒有影響的。

如果抗體很快（1-2周）會使用，推薦在4℃保存，這是為了避免反復凍融對抗體活性的損害。如果要長期保存則是在-20℃ or -80℃。zui關鍵的一點是要根據說明書推薦的方式來正確的保存抗體！

但是，腹水形式的產品請在收到后立即凍起來！因為該類產品含有大量的蛋白酶，長期在4oC保存會導致抗體的降解！

4. 大部分抗體的運輸條件：一般的運輸過程需要1-2周的時間，所以是在4℃的條件下來完成的。

4℃運輸zui主要的目的是為了避免反復凍融對抗體活性的損害（如果使用干冰運輸，那么收到時抗體是凍起來的，為了分裝就需要解凍。這就多了一次凍融的過程）。所以運輸過程中避免干冰運輸！

特殊抗體的保存條件：

酶聯抗體：永遠保存在4℃，避免凍起來。否則會導致酶活性的下降或者喪失
偶聯抗體：所有偶聯抗體都需要在棕色管中或使用錫箔紙避光4℃保存。尤其是熒光抗體，對光極為敏感，因此在所有的實驗階段也是要避光操作的！
IgG3的同型對照：永遠保存在4℃，避免凍起來。因為如果出現凍融過程，該抗體非常容易形成多聚體
無論是保存還是運輸，避免反復凍融！
反復凍融會導致抗體變性，導致多聚體形成，從而降低抗體的結合能力！

抗體保存其它相關信息：

關于加入甘油保存：

有些人會加50%的甘油到抗體中來避免反復凍融，甘油在-20℃ 會降低冰點。這對很多抗體可能是可行的。但是abcam僅對非常小的一部分抗體檢測過其在這種條件下的穩定性；而Abcam只對按照推薦條件保存的抗體提供質量保證！加入甘油的溶液不建議在-80℃保存，因為這已經超過了甘油的冰點。如果您要加入甘油來保存抗體的話，請謹慎注意無菌操作，避免污染！

關于蛋白保護劑：

蛋白在高濃度時更不容易降解（1 mg/ml 或者更高），這就是為什么在抗體中加入BSA之類作為穩定劑的原因了；另一方面，加入的蛋白也可以減少抗體由于管壁吸附所造成的損失。但是如果抗體要用來標記的話，則不能加入蛋白穩定劑，因為這些穩定劑會和抗體一起競爭結合標記物。

關于*（sodium azide）的使用：

為了防止微生物污染，*經常被加入到抗體中（終濃度0.02% （w/v））。Abcam的很多抗體已經含有了0.02％-0.05%的*，在說明書的“Storage buffer”中有標明的。

在下述情況中不能使用*：

如果抗體用于染色或處理活細胞，用于體內研究：
*在抵抗微生物的同時，對其它大部分有機物也是有毒的，因為它阻斷了線粒體的cytochrome electron transport system.

要偶聯帶有氨基基團的抗體：
*會干擾任何含有氨基基團的偶聯，因此在進行偶聯之前，應將*去除。偶聯后的抗體可以加入*保存，但是濃度只能是0.01％。對于需要偶聯的抗體，thimerosal （merthiolate）可以替代*作為保護劑！