巨噬細胞和淋巴細胞非特異性酯酶染色的方法

非特異性酯酶
一固定液 甲醛-丙酮緩沖液（PH=6.6）
Na2HPO4 20mg，12 ， 50.39mg
KH2PO4 100mg
dH2O 30ml
丙酮 45ml
40%甲醛 25ml

固定血細胞用

二孵育液4%
1．付品紅 4g
2N鹽酸 100ml將付品紅加入到2n鹽酸中，水浴溶解過濾后，置4℃，保存備用
2．4%*液
* 400mg
蒸餾水 10ml
3．六偶氮付品紅溶液
臨用前取4%*溶液3ml，邊搖邊滴入3ml付品紅中，再充分震蕩，1min備用
4．2%α醋酸萘酯溶液：取2gα醋酸萘酯溶于100ml乙二醇甲醚中，置4℃冰箱，避光保存備用
5．M/15PH7.6磷酸緩沖液
甲液：KH2PO49.08g溶于1000ml蒸餾水，乙液Na2HPO49.47g溶于1000ml蒸餾水 12H2O，23.882
取甲液13ml，乙液87ml，混合即可
KH2PO40.59g,Na2HPO412H2O 10.39g-500ml
孵育液臨用前配制：取m/15，PH=7.6緩沖液89ml，逐滴加入六偶氮付品紅液6ml，充分混合后，再滴入2%醋酸萘酯2.5ml，充分混合后調整pH至5.8-6.4

以下石蠟切片，冰凍切片可以用4%多聚甲醛固定，先固定與切片后固定均可

二石蠟切片
1． 將被檢組織置于4℃10%中性甲醛鈣溶液中固定，過夜
2． 移入4℃holt氏阿拉伯膠糖液至少24hr
3． 置于4℃50%丙酮1hr
4． 轉入4℃丙酮24hr（換兩次），zui后一次留在室溫約1-2hr
5． 在二甲苯 中透明30min（換兩次）
6． 56℃浸蠟30-45min
7． 切片 置于室溫或37℃溫箱干燥1-2hr。
8． 二甲苯脫蠟，經丙酮，50%丙酮各2-3min，然后進入蒸餾水
9． 孵育后步驟與血涂片同，但需經50%丙酮及純丙酮各30s-1min，二甲苯 透明，然后封藏

holt氏阿拉伯膠蔗糖液
蔗糖30g
阿拉伯膠1g
100ml

用這個酶擴散少些。

1%甲基綠染色液

用于復染