大腸菌群快速紙片檢測試劑盒（食品、飲料）使用說明

大腸菌群快速紙片檢測試劑盒
（食品、飲料）
使 用 說 明
【包裝規(guī)格】60份/盒 共180張
【預(yù)期用途】用于大腸菌群的檢測
【檢驗原理】應(yīng)用滅菌的濾紙吸收選擇性培養(yǎng)基，細(xì)菌通過濾紙纖維膨脹而被固定并生長繁殖，大腸菌群在發(fā)育時伴隨產(chǎn)生琥珀酸脫氫酶將紙片上的TTC（紅四碳唑）還原成不可逆的Formazane產(chǎn)生紅色色素，即大腸菌在紙片培養(yǎng)上呈紅菌落，菌落周圍產(chǎn)生黃圈是大腸菌分解乳糖產(chǎn)酸使指示劑變色的結(jié)果。
【儲存條件及有效期】2℃～8℃保存  有效期12個月
【標(biāo)本處理】
1、樣品處理：液體樣品按國標(biāo)方法進(jìn)行；固體樣品，取25g樣品，研碎加入25ml滅菌鹽水混勻。
2、接種：液體樣品吸取三個1mL分別涂布于三疑于三張紙片，再吸取1︰10、1︰100稀釋液各三個1ml，分別涂布于三張紙片。固體樣品，吸取1︰1混懸液三個1mL（1g）分別涂布于三張紙片，再吸取1︰10、1︰100稀釋液各三個1ml，分別涂布于三張紙片，而后用手輕輕壓平，置36±1℃溫箱，培養(yǎng)15小時觀察結(jié)果。
【檢驗方法】將接種好的紙片，袋口朝上，豎直放置于37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)12～18小時。
【結(jié)果判斷】
1、 紙片上出現(xiàn)紫紅色菌落，其周圍有黃圈者為陽性。
2、 紙片為一種顏色，無菌落生長者為陰性。
3、 紙片呈紫色，有紫紅色菌落，其周圍無黃圈者為陰性。
4、 酸性食品接種后，紙片變黃，經(jīng)培養(yǎng)后無紫紅色菌落為陰性。
5、 紙片變色呈現(xiàn)不典型菌落，結(jié)果可疑者，應(yīng)做復(fù)發(fā)酵進(jìn)驗證。
【結(jié)果報告】根據(jù)紙片的陽性片數(shù)，查對大腸菌群MPN檢索表，報告之。
【注意事項】
1、應(yīng)避光低溫（10℃以下）保存，并注意防潮，如發(fā)現(xiàn)紙片變?yōu)榉奂t色即為失效。
2、檢查酸性食品時，需用10%無菌碳酸鈉溶液調(diào)PH至中性后，再檢測。
3、可疑結(jié)果的判斷：
大腸菌群量的多少與結(jié)果的顯示密切相關(guān)，可出現(xiàn)3種不同現(xiàn)象：⑴菌量較大（≥103cfu/ml），整個紙片變黃而又無紅色斑點（或紅暈）；⑵菌量適中（102～103 cfu/ml），整個紙片也變黃，但有小而密集的紅色斑點；⑶菌量較少（≤102cfu/ml），紙片可呈紫藍(lán)色，并有散在或較密集的紅色斑點，其周圍變黃。因此菌量較大時，可能出現(xiàn)可疑現(xiàn)象。此時應(yīng)通過加大樣品稀釋度或進(jìn)一步做復(fù)發(fā)酵進(jìn)行證實。其它可疑現(xiàn)象也可通過發(fā)酵實驗進(jìn)行確認(rèn)。
4、 確認(rèn)試驗的方法：進(jìn)行確認(rèn)試驗，用滅菌攝子無菌操作將可疑紙片移種到乳糖發(fā)酵管里，置37℃24小時培養(yǎng)后，對其產(chǎn)酸產(chǎn)氣者判為大腸菌群陽性，否則判為陰性。