β—半乳糖苷酶標記試劑

β—半乳糖苷酶標記試劑

β—半乳糖苷酶已被廣泛用于酶標記免疫分析，但主要用于免疫細胞化學。一種較好的底物是5—溴—4—氯—3—吲哚—β—D—吡喃型半乳糖苷（BCIG），它可以產(chǎn)生一種深藍色的產(chǎn)物。此產(chǎn)物在乙醇和水中穩(wěn)定，不溶解。

1．需要的溶液、試劑和特殊設備
BCIG；
N，N—二甲基甲酰胺；
1mmol／LMgCl2；
3mmol／L亞鐵氰化鉀用PBS溶解，DPX。
光學顯微鏡（通常帶有照相機以便于記錄結(jié)果）。

2．操作步驟
（1）用0．1mlDMF溶解4．9mgBCIG。
（2）加0．1mlBCIG溶液至10ml含有1 mmol／L MgCl2 3retool／L亞鐵氰化鉀的PBS中。
（3）濾紙過濾。
（4）加此溶液至標本，在室溫孵育10～40min，用水沖洗終止反應。
（5）優(yōu)化：如果需要，進行復染。
（6）用DPX封片。