DTT 二硫蘇糖醇

DTT 二硫蘇糖醇

二硫蘇糖醇（Dithiothreitol，簡稱為DTT）是一種小分子有機還原劑，化學式為C4H10O2S2。其還原狀態下為線性分子，被氧化后變為包含二硫鍵的六元環狀結構。二硫蘇糖醇的名字衍生自蘇糖（一種四碳單糖）。DTT的異構體為二硫赤糖醇（DTE），即DTT的C3-差向異構體。

還原性
DTT是一種很強的還原劑，其還原性很大程度上是由于其氧化狀態六元環（含二硫鍵）的構象穩定性。它的氧化還原電勢在pH為7時為-0.33伏。二硫蘇糖醇對一個典型的二硫鍵的還原是由兩步連續的巰基-二硫鍵交換反應所組成：

其中，*步反應所形成的中間態很不穩定，因為DTT上的第二個巰基趨向于與被氧化的硫原子連接，使中間態很快被轉化為DTT的環狀氧化結構，從而完成對二硫鍵的還原。

DTT的還原力受pH值的影響，只在pH值大于7的情況下能夠發揮還原作用。這是因為只有脫去質子的硫醇鹽負離子（-S–）才具有反應活性，硫醇（-SH）則沒有；而巰基的pKa一般為～8.3。

應用
DTT的用途之一是作為巰基化DNA的還原劑和去保護劑。巰基化DNA末端硫原子在溶液中趨向于形成二聚體，特別是在存在氧氣的情況下。這種二聚化大大降低了一些偶聯反應實驗（如DNA在生物感應器中的固定）的效率；而在DNA溶液中加入DTT，反應一段時間后除去，就可以降低DNA的二聚化。

DTT也常常被用于蛋白質中二硫鍵的還原，可用于阻止蛋白質中的半*之間所形成的蛋白質分子內或分子間二硫鍵。但DTT往往無法還原包埋于蛋白質結構內部（溶劑不可及）的二硫鍵，這類二硫鍵的還原常常需要先將蛋白質變性（高溫加熱或加入變性劑，如6M 鹽酸胍、8M 尿素或1% SDS）。反之，根據DTT存在情況下，二硫鍵還原速度的不同，可以判斷其包埋程度的深淺。

特點
由于容易被空氣氧化，因此DTT的穩定性較差；但冷凍保存或在惰性氣體中處理能夠延長它的使用壽命。由于質子化的硫的親核性較低，隨著pH值的降低，DTT的有效還原性也隨之降低；而Tris（2-carboxyethyl）phosphine HCl（TCEP鹽酸鹽）可以作為低pH值條件下DTT的替代品，而且也比DTT更為穩定。