微生物培養基手冊大全

微生物培養基手冊大全
1、營養瓊脂（普通瓊脂）
成份：牛肉浸液（或其它浸液，消化液或肉膏湯） 100毫升
瓊脂（視天氣，瓊脂質量而定）
制法：將上物加熱溶解，補足水，調ph至7．6，過濾分裝121℃，高壓滅菌15分鐘。
用途：作普通瓊脂平皿。

2、*（BA）
制法：取營養瓊脂（PH7．6），加熱使其溶解待冷至45-50℃，以滅菌操作于每100毫升營養瓊脂加滅菌脫纖維羊血或兔血5-10毫升,輕輕搖勻，立即傾注于平板或分裝試管，制成斜面備用。
用途：1． 一般棉拭子均接種此培養基。
2．尿液，膿液
3．分離細菌標本用。

3、基礎培養基 （肉膏湯BB）
成份：蛋白胨 10克 牛肉膏 5克
氯化鈉 5克 水 1000毫升
制法：將以上各物稱好，加水煮沸溶解，用1NNOH校正PH至7．6，過濾分瓶，121℃高壓滅菌，20分鐘備用。
用途：1 作耐藥試驗，增菌用分裝小管。
2 作普通瓊脂斜面。

4、血液培養基（大管肉湯培養基）
成份：1 新鮮牛肉浸液 1000毫升
2 PABA（對氨基苯甲酸〔相當于10mg/毫升〕） 1g% 1毫升
3 MgSO4 [相當于0．493/100毫升] 49．3% 1毫升
4 枸椽酸鈉 0．3g
制法：1 將1號，4號混合液，2號，3號液分裝高壓滅菌。
2 取滅菌1，4號混合液用無菌法加入PABA，MgSO4，再分管，行無菌試驗三天方可使用。
用途：作血，骨髓培養用。

5、腸道桿菌培養基（伊紅美蘭瓊脂）
成份： 蛋白胨 10克 乳糖 10克
氯化鈉 5克 瓊脂 25（22）克
水 1000毫升 2%伊紅溶液20毫升
0．5%美蘭溶液 20毫升
制法：將蛋白胨，氯化鈉瓊脂稱好，加水1000毫升使溶解，校正PH7．4過濾，補足失水，加入2%伊紅溶液20毫升，0．5%美蘭溶液20毫升，（115℃高壓20分鐘），冷卻至50℃左右傾注平板，凝固后存冰箱備用。（高壓以后方可再加乳糖）

用途：用作分離沙門氏，志賀氏菌屬，也作菌群調查。
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6、羅文斯坦培養基
成份：磷酸二氫鉀 2．4克 * 0．24克
枸椽酸鈉 0．6克 天門冬素 3．6克
純甘油（丙三醇） 12毫升 水 600毫升
馬鈴薯粉 30克 雞蛋 1000毫升（約3公斤）
2%孔雀綠水溶液 20毫升
制法：1 除雞蛋外（還有孔雀綠）?？蓪⑵渌锲贩Q好，放入大三角瓶包扎好，高壓滅菌。
2 雞蛋用75%酒精泡30分鐘，滅菌法打蛋，倒入盛有玻璃珠的滅菌三角燒瓶內充分將雞蛋搖散。
3 將各成份按比例配好，分裝每管約5毫升。
4 間歇滅菌*次90℃1小時，第二次80℃半小時，第三次80℃半小時（或放85℃烤箱內連續二次）。
質控標準： 1 滅菌試驗合格。
2 接種結核桿菌要求兩星期生長良好。
用途：作結核分枝桿菌培養用。

7、結核半固體培養基
成份：* 19克 * 0．6克
磷酸二氫鉀 2．5克 天門冬素 5克
1%孔雀綠 1．5克 甘油 20毫升
吐溫80（10%） 5毫升 水 1000毫升
枸椽酸鈉 2．5克 動物血清 100毫升
瓊脂 1．5克（80小時用甲醇去脂）
1%孔雀綠 0．78毫升 吐溫80（10%） 5毫升
加動物血清 100毫升
制法： 1 除血清外將上述藥品均稱好，放入煮沸溶解，調PH7。2
2 分管（每管約10毫升）包扎好，高壓，121℃半小時滅菌。
3 待冷后無菌法加無菌血清（綿羊血或兔血）每管約1毫升備用。
4 去除瓊脂方法：取瓊脂若干或于三角燒瓶中加甲醇于瓊脂1毫升用塞密封，放37℃溫浴80小時，每天搖動一次，冷卻后到時取出用濾紙過濾，待瓊脂自然冷卻后備用。
質控標準：1無菌實驗合格。
2瓊脂硬度合適而清亮。
3接種標準結核桿菌用，強度合適即可用。
用途：培養結核桿菌用。

8、亞碲酸鉀*
成份：瓊脂基礎 100毫升 1 0%葡萄糖 2毫升
1%亞碲酸鉀 4．5毫升 綿羊血 10毫升
制法：1將瓊脂基礎溶解好，加入羊血。
2馬上加熱使成咖啡色后，稍冷再加入10%葡萄糖2毫升與1%亞碲酸4．5毫升混合后倒入無菌平板，凝固后存冰箱備用。
質控標準：接種白喉桿菌生長良好，其它革蘭氏陰性菌均抑制生長。
用途：供培養及鑒別白喉桿菌用。

9、米培養基
成份：白米 20克 水 1000毫升
瓊脂 20克 吐溫80 10毫升
制法：1將20克米加水200毫升煮沸45分鐘，煮時將容器蓋好。
2用紗布過濾，只要米湯，不要飯，加水至1000毫升。
3加瓊脂20克，吐溫-80 10毫升煮溶，分裝中型管（每管約3毫升），包扎好，高壓，121℃半小時，消毒備用。
質控標準：1滅菌。
2要求清亮。
3接種白色念珠菌17-24小時生長良好，并產生厚膜孢子。
用途：培養白色念珠菌用。

10、蛋白胨水培養基
成份：蛋白胨 1克 氯化鈉 0．5克
水加至 100毫升 PH調至 7．8
制法：把以上各物稱好溶于水，調節PH7．6分裝消毒備用。
質控標準：1 放置37℃無菌生長。
2 接種大腸桿菌24小時生長良好。
3 可作中國蘭平板基礎液。
可作靛基質基礎液（作此試驗需要*蛋白胨）。

11、血培養基
成份：蛋白胨 10克 牛肉膏 5克
氯化鈉 5克 葡萄糖 3克
枸椽酸鈉 3克 MgSO4。7H2O 20毫升
0．5%PABA 10毫升 酵母浸液 10毫升 0．2克（2%過濾）
*酚紅0．4% 6毫升 水 1000毫升
瓊脂 0．5克
*：作大BB，小BB時，不要加酚紅和瓊脂。
制法：1、除PABA、*、酚紅外均稱好煮化調PH7．4
2、調好PH后再加酚紅。
3、*、PABA另外無菌再加入（亞細，小BB）

12、沙氏培養基
成份：蛋白胨 1克 水 100毫升
瓊脂 1．5克（瓊脂粉1克%） 葡萄糖或麥芽糖 4克

制法：1將上述物質稱好，放入水中煮沸溶解（不必調PH即有5左右）分中號試管（約4毫升）包扎，高壓115℃20分鐘。
2 趁熱斜好，凝固備用。
質控標準：1無菌試驗合格。
2接種霉菌比在其它培養基上生長良好，其它菌生長不好。
用途：作分離培養霉菌用。
注意：1 接種臨床新鮮標本可先加1-2滴70%酒精讓干后再接種于含12．5%*沙氏斜面培養基上。
2 也可用蜂蜜8克代替葡萄糖或麥芽糖。

13、肉渣培養基
成份： 牛肉渣 牛肉浸液（牛肉膏）
制法：將做牛肉浸液的牛肉渣，裝入試管，高約3毫米，加入牛肉浸液或牛肉膏湯（PH7．6）約5毫升，比肉渣高一倍，液面上加入已溶解的凡士林，高約0．5厘米（不加也可），121℃高壓滅菌20-30分鐘后保存于冰箱內備用 。
用途：用于厭氧菌培養。
注意：如無肉渣也可用牛、羊血等代替，將血塊先放入水內煮沸，取出成小塊，血塊在加熱后搖勻成碎顆粒狀。

14、單糖發酵管培養基（半固體）
成份： PH7．6-7．8蛋白胨水 1000毫升（0．3克/100毫升）
1.2%酚紅液 0．4毫升
瓊脂 0．4 - 0．5克
10%糖或醇 10毫升
制備：把蛋白胨水，瓊脂加熱溶解，然后加1．2%酚紅液0．4毫升，10%糖10毫升，混勻，分裝試管，每管約2-3毫升，經115℃高壓滅菌20分鐘后，分置于試管架上，貼上各類糖或醇類標簽備用。
質控標準：細菌發酵糖類或醇而產生酸，能使培養基PH改變，指示劑由紅變黃色，如因發酵產生氣體則半固體內產生氣泡，如有動力則半固體由清亮變混濁。

15、明膠培養基
成份：肉浸液 1000毫升（牛肉浸膏5克）
明膠 12克
制法：
100毫升肉浸液中，加入明膠12克，隔水加熱煮化，校正PH7．2，分裝小號試管，用阿諾氏間歇滅菌80℃30分鐘，連續3日，或者108℃高壓20分鐘，冷卻，貯存備用。

15-1、堿性蛋白胨水
成份：
蛋白胨 20克 氯化鈉 5克
硝酸鉀 0．1克 結晶碳酸鈉（NaclCO3．12H2O） 0．2克
水 1000毫升
制法：將蛋白胨，Nacl，硝酸鉀，結晶碳酸鈉稱好，溶于1000DW中，校正PH8．4分裝試管，121℃高壓滅菌15分鐘后備用 。
用途：用于霍亂弧菌培養。

16、葡萄糖蛋白胨水（M。V用）
成份：蛋白胨 5克 葡萄糖 5克
K2HPO4 5克 水 1000毫升
制法：將上述稱好溶解分裝試管，調PH7．4高壓滅菌115℃ 滅菌20分鐘 ，或者葡萄糖加熱煮沸后再倒試管
標準：滅菌試驗合格。接種大腸桿菌VP陰性，M陽性；接種產氣桿菌VP陽性，M陰性。
用途：作鑒別腸道桿菌用。

17、枸椽酸鹽培養基
成份：磷酸二氫銨 0．1克 * 0．02克
* 0．1克 枸椽酸鈉 0．23--0．5克（0．36）
氯化鈉 0．5克 瓊脂 1．5克
0．5%溴*蘭2毫升 （調PH6．8再加）
制法：將上述稱好，放入水中煮沸溶解，調PH6．8，然后分裝中號試管，高壓滅菌，趁熱倒呈斜面，凝固
后備用。
標準：1、滅菌試驗合格，培養基呈果綠色適宜。
2、接種大腸桿菌，培養基上不生長，也不變色。
3、接種產氣桿菌，培養基呈深蘭色。
用途：作鑒別大腸桿菌用。

18、雙糖鐵培養基
成份：
下層：蛋白胨 1克 氯化鈉 0．5克
葡萄糖 0．2克 瓊脂 0．3-0．5克
水 100毫升
將上述物質混勻調PH7．6后加1．2%酚紅0．4毫升
上層：蛋白胨 1克 氯化鈉 0．5克
乳糖 1克 * 0．03克
* 0．02克 瓊脂 1克
水 100毫升
制法： 1將下層配好，分裝中號試管（1毫升），塞好包扎，15磅高壓滅菌半小時，使凝固后備用。
2制上層時，先將蛋白胨水制好，加入*，*，加熱溶解PH8．1，再加入酚紅分瓶，（每瓶300毫升，稱取瓊脂包扎滅菌，趁熱加入乳糖隔水煮沸30分鐘或112℃消毒15分鐘）。
3取已制的下層管，每管用無菌法倒入上層液約1。5毫升，邊斜放置使成斜面，凝固后備用。
標準：無菌試驗合格，接種大腸桿菌下層產酸產氣，上層產酸。

19、尿素培養基
成份：蛋白胨 0．1克 氯化鈉 0．5克
磷酸二氫鉀 0．2克 尿素 0．2克（或10%2毫升）
葡萄糖 0．01克（或10%葡萄糖0．1毫升）
H2O 100毫升 酚紅（0．2%） 0．4毫升
制法：1除葡萄糖，尿素外把其它藥品稱好放入水中煮沸，使溶解，調PH7．2過濾，15磅高壓滅菌15分鐘．
2配制尿素（滅菌）液：每100毫升基液內加2毫升．
3配制10%葡萄糖（滅菌）每100毫升加0．1毫升．
4分裝小試管待用．
標準：
1滅菌試驗合格．
2接種變形桿菌24小時呈紅色．
用途：鑒定變形桿菌用．

20、膽鹽中性紅瓊脂
成份：蛋白胨瓊脂PH7．2-7．4 5000毫升
膽 鹽 2．5克
乳糖 5．0克
對氨基苯甲酸 25毫克
1%中性紅溶液 25毫升
制法：
將膽鹽，對氨基苯甲酸，乳糖趁熱加入已滅菌之蛋白胨瓊脂中，待冷至50-60℃時，加入1%中性紅液2．5毫升，混合后即傾注平皿，凝固待用．
*：1%中性紅：1克中性紅加酒精60毫升，加水40毫升

21、丙二酸鹽培養基（縮蘋果酸鈉）
成份：丙二酸鈉 0．3克 酵母浸膏 0．1克
Nacl 0．2克 硫酸銨 0．2克
K2HPO4 0．06克 KH2PO4 0．04克
水 100毫升
PH6．8，高壓滅菌備用．
0．2%溴麝香酚蘭乙醇 1．25毫升
制法：與枸椽酸鹽利用試驗相類似，是測定細菌能否利用丙二酸鹽與碳源．無機銨鹽為氨源而生長，生長者使培養基變成堿呈蘭色．
鑒定： 克氏桿菌 （+） 赫夫尼亞 （+）
沙門氏菌 （—） 痢疾桿菌 （—）