大鼠白介素2elisa試劑盒對胰島移植大鼠長期存活效果的研究

胰島移植長期以來被認為是治療Ⅰ型糖尿病的一種頗具吸引力的療法，并具有相當的優勢。為了研究胰島移植中tacrolimus,rapamycin和AntiIL-2antibody在嚙齒類動物之間防止排斥反應的機理和現象，本課題選用Wistar大鼠為胰島移植物的供體，C57BL/6(B6)作為移植受體，移植物經分離和純化后被移植入受體大鼠的腎包膜下，為了更好的模擬臨床胰島移植的效果，根據EdmontonProtocol方案進行用藥。

大鼠被隨機的分為5組，依次是：control組，tacrolimus+rapamycin組，tacrolimus+AntiIL-2antibody組，rapamycin+AntiIL-2antibody組，tacrolimus+rapamycin+AntiIL-2antibody組. 

實驗方法：供體胰島分離和純化采用Wistar大鼠進行，胰腺組織經膠原酶P消化，通過Ficoll梯度離心分離純化之后，在37℃(98.6°F)，5％的二氧化碳溫箱中孵育不超過2小時，將分離純化后的胰島細胞移植入C57BL/6(B6)受者大鼠腎包膜下，每只大鼠移植300-400個胰島為宜。移植后每周三次對各組大鼠應用*進行尾靜脈采血，測量血糖，每周三次，連續100天受體血糖水平不超過18mmol/L，即為長期存活。組織學檢查：于胰島細胞移植第10天和第105天大鼠腎臟做病理切片，10％甲醛包埋，石蠟包埋，蘇木精-伊紅染色，鏡下觀察組織學變化。糖耐量試驗：術后兩周，進行糖耐量試驗，所有受體B6大鼠均給予20％葡萄糖(1g/kg體重)腹腔內注射，于注射前和注射后30，60，90，120min測定血糖，并與對照組糖尿病大鼠做統計學兩兩比較。外周血CD4+，CD4+T細胞亞群及IL-2含量試驗并進行統計學分析。 

結果：應用不同免疫抑制劑方案后，移植受體存活時間比較應用不同免疫抑制劑方案后，移植受體平均存活時間如下表，一般認為移植物存活時間超過100天即為長期存活。可以看出應用Tacrolumus+Rapamycin的組，存活時間約為140天左右，85.7％的大鼠存活時間超過100天，明顯高于對照組(P=0.000)，具有顯著性差異(表6-1)；應用Tacrolumus+Rapamycin+AntiIL-2antibody的組(n=7)，移植受體存活時間平均約為161天左右，其中28.5％的大鼠存活時間超過200天，一只為109天，五只大鼠存活時間超過150天，兩只超過200天，與對照組相比，(P＜0.001)，具有顯著性差異。各組腹腔內注射葡萄糖后，對照組血糖濃度明顯高于其他四組，60分鐘以后，對照組血糖水平下降緩慢，直到120分鐘仍然維持高血糖狀態，恢復緩慢，另外四組中T+A+R聯合用藥組血糖zui終恢復到糖耐量試驗前的水平，與對照組相比，有顯著性差異，(P＜0.001)。 

結論：根據Edmontonprotocol，選擇性的應用Tacrolimus，Rapamycin，Anti-interleukin-2antibody三種藥物，防治移植術后機體免疫系統的排斥反應，均不同程度的延長了移植物的存活時間，其中以三種藥物聯合應用，移植物存活時間zui長。免疫抑制劑能夠明顯提高大鼠胰島細胞移植的長期存活率，延長移植物存活時間，與對移植免疫排斥反應的抑制作用，并用各種相關指標顯示出來。