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    超微量Na+K+—ATP酶測試盒的組成和操作原理

    時間:2015/8/5閱讀:661
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    超微量Na+K+—ATP酶測試盒的組成和操作原理

    一、ATP酶存在于組織細胞及細胞器的膜上,是生物膜上的一種蛋白酶,它在物質運送、能量轉換以及信息傳遞放免具有重要的作用,機體在缺氧及一些疾病狀態下,此酶活力發生一系列改變,另外有些遺傳疾病也與此酶活力有關。

    二、測定原理:

    ATP酶可分解ATP生成ADP及無機磷,測定無機磷的量可判斷ATP酶活力的高低。

    三、試劑組成和配置:



    組分

    50T/25

    100T/50

    保存

    試劑一

    液體

    13ml X 1

    13ml X 2

    4℃保存6個月

    試劑二

    液體

    4ml X 1

    4ml X 2

    4℃保存6個月

    試劑三

    粉劑

    粉劑X 4

    粉劑X 8

    -20℃保存6個月

    試劑三的配制:用時每支試劑三粉劑加雙蒸餾水1ml,充分溶解。(用不完-20℃以下可保存一周。)

    試劑四

    液體

    5ml X 1

    5ml X 2

    4℃保存6個月

    試劑五

    甲液

    7ml X 4

    7ml X 8

    4℃保存6個月

    乙液

    6ml X 1

    6ml X8

    4℃避光保存6個月

    注:試劑五乙液在冬天或4℃長時間保存時可能會出現凝膠狀物質,37℃溶解不了,可將其60℃左右水浴10分鐘即可*溶解;甲液、乙液應防止磷污染。

    試劑六

    液體

    50ml X 1

    50ml X 2

    室溫保存6個月

    試劑七

    10mmol/L

    標準磷貯備液

    5ml X 1

    5ml X 1

    4℃保存6個月

    試劑十

    貯備液

    0.1ml X 3

    0.1ml X6

    4℃保存6個月

    稀釋液

    0.9ml X 3

    0.9ml X6

    4℃保存6個月

    試劑十的配制:取一支試劑十稀釋液加入一支試劑十貯備液中,用不完的4℃保存。

    0.1umol/ml標準磷應用液的配制:用時將10mmol/L磷貯備液100倍稀釋,即取0.1ml加雙蒸水至10ml

    0.02umol/ml磷標準液的配制:用時將0.1umol/ml磷標準液用雙蒸水5倍稀釋,即取0.1umol/ml磷標準液1ml加雙蒸水4ml

    基質液的配制: 按試劑一:試劑二:試劑三=2608080比例混合。需多少配多少,現用現配

    顯色劑的配制:用時取一瓶試劑五甲液加入一瓶已預溫好試劑五乙液中,充分混勻,需提前0.5小時配制,2--8℃條件下至少可保存5天,配好的顯色劑的量夠做13個管子(如果你的樣本量很少,所需的顯色劑的量較少,那么你可以按試劑五的甲液:乙液=7:6的比例自行配制顯色劑,需多少配多少(按比例配制顯色劑時要防止磷污染,用吸嘴)。

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