實驗討論：小鼠細小病毒（MVM）ELISA方法的建立和應用

    小鼠細小病毒(MVM)普遍存在于開放飼養的實驗小鼠群中,呈隱性感染狀態,在某些條件下,可誘發此病,以致影響實驗結果。由于小鼠呈隱性感染時,無臨床癥狀,也無病理形態學的改變,很難分離到病毒,所以血清抗體的檢測在診斷上有著重要的意義。

    小鼠細小病毒病是具有高度接觸性的烈性傳染病，既嚴重威脅著寵物的身體健康，又是對當前我國畜牧業、毛皮動物養殖業和野生動物保護業危害較大的疫病。在小鼠細小病毒病診斷方法中，ELISA檢測方法方便快捷、費用低廉，適于在基層推廣。采用F81細胞大量擴增小鼠細小病毒CPV-GN株，利用聚已二醇(PEG6000)濃縮后，測得其蛋白濃度的基礎上。采用倍比稀釋法獲得一系列的蛋白濃度值，同時將陽性血清也倍比稀釋，利用方陣滴定法進行酶聯免疫吸附試驗(ELISA)檢測確定了抗原*的包被濃度為9μg／ml；陽性對照的血清稀釋度為1：160。zui適的封閉液為1.75％的明膠，封閉條件為37℃1h；待檢樣品與包被抗原的反應時間為37℃2h：酶標二抗的反應時間為37℃1h。經過一系列的驗證試驗，證明建立的間接ELISA方法具有較強的穩定性和特異性。取50份免疫小鼠血清，用該方法與常規的HI試驗分別進行抗體檢測，兩者的共同符合率為94％。其中，明顯陽性和陰性的樣品，共同符合率能達到100％。說明建立的間接ELISA方法具有簡便、快速、特異的優點。