色譜柱使用前如何進(jìn)行活化處理？

不同類(lèi)型的色譜柱活化方法有所不同，以下分別介紹常見(jiàn)的氣相色譜柱和液相色譜柱使用前的活化處理方法：

一、氣相色譜柱

1. 老化：將色譜柱安裝在氣相色譜儀上，通載氣，設(shè)置程序升溫。一般從較低溫度開(kāi)始，以較慢的速率升溫至略高于實(shí)際使用溫度但低于色譜柱的最高耐受溫度，保持?jǐn)?shù)小時(shí)甚至更長(zhǎng)時(shí)間，具體時(shí)間和溫度根據(jù)色譜柱的類(lèi)型和說(shuō)明書(shū)而定。例如，對(duì)于一般的毛細(xì)管氣相色譜柱，可能從 50℃開(kāi)始，以 5℃/min 的速率升溫至 250℃，保持 2 - 4 小時(shí)。老化的目的是去除色譜柱內(nèi)殘留的溶劑、雜質(zhì)以及低沸點(diǎn)的固定相降解產(chǎn)物等，使固定相更好地分布在柱壁上，提高柱效和穩(wěn)定性。

2. 穩(wěn)定基線(xiàn)：老化完成后，待色譜柱溫度降至室溫，再將儀器的檢測(cè)器打開(kāi)，繼續(xù)通載氣，讓基線(xiàn)穩(wěn)定。穩(wěn)定的基線(xiàn)是進(jìn)行準(zhǔn)確分析的前提，通常需要觀(guān)察基線(xiàn)的波動(dòng)情況，直至基線(xiàn)平穩(wěn)，一般需要 0.5 - 1 小時(shí)左右。

二、液相色譜柱

1. 沖洗：新的液相色譜柱在使用前通常需要用適當(dāng)?shù)娜軇┻M(jìn)行沖洗。如果是反相色譜柱，常用甲醇或乙腈作為初始沖洗溶劑，以低流速（如 0.2 - 0.5 mL/min）沖洗色譜柱，將柱內(nèi)的保護(hù)液或雜質(zhì)沖洗掉。沖洗體積一般為柱體積的 5 - 10 倍。例如，對(duì)于一根 250 mm×4.6 mm 的色譜柱，柱體積約為 4.2 mL，那么沖洗體積大約在 21 - 42 mL 左右。

2. 平衡：沖洗完成后，更換為流動(dòng)相進(jìn)行平衡。將流動(dòng)相以正常分析流速通過(guò)色譜柱，使色譜柱達(dá)到平衡狀態(tài)。平衡過(guò)程中需要監(jiān)測(cè)色譜圖，觀(guān)察基線(xiàn)的穩(wěn)定性和柱壓的變化。一般需要平衡 30 分鐘至數(shù)小時(shí)，直到基線(xiàn)穩(wěn)定且柱壓不再有明顯波動(dòng)。如果是梯度洗脫方法，還需要進(jìn)行梯度平衡，以確保在不同的流動(dòng)相組成下色譜柱都能保持穩(wěn)定的性能。

在活化處理色譜柱時(shí)，一定要嚴(yán)格按照色譜柱的說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，避免因活化不當(dāng)導(dǎo)致色譜柱性能下降或損壞。