蘇州阿爾法生物實驗器材有限公司
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用途：（1）用于大多數哺乳動物貼壁細胞系的瞬時轉染和穩定細胞系構建； （2）用于大多數哺乳動物懸浮細胞系的穩定細胞系構建。
懸浮細胞轉染試劑-QuickShuttle-Superfast 快速轉染試劑
QuickShuttle-Superfast 快速轉染試劑
貨號：KX0110043
含量：0.8 ml
用途：（1）用于大多數哺乳動物貼壁細胞系的瞬時轉染和穩定細胞系構建（立傳立轉）；
（2）用于大多數哺乳動物懸浮細胞系的穩定細胞系構建。
| 產品名稱 | 貨號 | 規格 | 產品用途 |
| QuickShuttle-Basic | KX0110041 | 0.8ml | 適用于大多數哺乳動物貼壁細胞系，可用于原代細胞和二倍體細胞 |
| QuickShuttle-Enhanced | KX0110042 | 0.8ml | 適用于大多數哺乳動物細胞系，專用于難轉細胞系 |
| QuickShuttle-Superfast | KX0110043 | 0.8ml | 細胞消化和轉染同時進行，立傳立轉?？捎糜趹腋〖毎?/span> |
| QuickShuttle-293 | KX0110044 | 0.8ml | 專用于各種293細胞，立傳立轉 |
| QuickShuttle-Hela | KX0110045 | 0.8ml | 專用于Hela細胞，立傳立轉 |
| QuickShuttle-BHK-21 | KX0110046 | 0.8ml | 專用于BHK-21細胞，立傳立轉 |
注意事項：
1. 質粒 DNA：請用能夠去除內毒素的方法制備高質量的質粒 DNA。
2. 稀釋液：0.85%（W/V）生理鹽水，用低內毒素純水配制，高壓消毒或除菌過濾。
3. 培養基：經過 DMEM、RPMI-1640 和 M199 等常規培養基測試，推薦使用含 5~10%牛血清的 DMEM，若轉染效果不理想可嘗試其它培養基。
4. 以 24 孔細胞板轉染實驗為例，推薦每孔低內毒素質粒 DNA 用量為 1~2µg、轉染試劑用量為 3~5µl， 請在正式實驗前根據不同細胞和不同培養基用報告基因進行優化。
5. 對于大多數哺乳動物貼壁細胞系，立傳立轉要求使用生長旺盛的細胞，即細胞生長至 80-90%成片或 剛長滿。若使用生長過老的細胞，將明顯影響立傳立轉的效率。
6. 本品不推薦用于貼壁性較差的貼壁細胞系，如各種 293 細胞等。
7. 本品對大多數哺乳動物懸浮細胞系有一定轉染效率，可用于穩定細胞系構建。
使用方法 ：
1. 將懸浮細胞或新鮮消化的貼壁細胞接種到 24 孔細胞板中，每孔 1~2×105細胞，1ml 培養基。
備 注：可在生長旺盛的貼壁細胞傳代后直接按下述步驟 2~5 進行轉染，無需 18~24 小時的等候時間。
2. 將 1~2μg 質粒 DNA 和 3~5μl 轉染試劑分別稀釋到 50μl 生理鹽水中。備注：質粒 DNA 和轉染試劑的 量需要根據不同細胞和不同培養基來優化，但理論上不超出 1~2µg 和 3~5µl 范圍。
3. 合并上述兩溶液并混勻。備注：無需其它轉染試劑所需的 10~30 分鐘的等候時間。
4. 將上述復合物直接加入到細胞培養基中，用加樣器吸打混勻。
備注：轉染復合物可直接加入含血清的 細胞培養基中進行轉染。
5. 將細胞板移至 37oC/5% CO2 孵箱中進行培養。
備注：無需在轉染后 4~6 小時補加血清或更換培養 基。
6. 24~72 小時后根據實驗需要進行瞬時表達分析或穩定細胞系加壓篩選。
備注：對于一些轉染效率高的 細胞系如 BHK-21 等，可在轉染后 24 小時進行后續實驗。
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